Interleukiin 28. genom - analüüsid ja hinnad

Interleukiin 28B geeni polümorfismide roll viirusliku C-hepatiidi ravi prognoosis.

Viimaste aastate uuringud on näidanud, et geneetilised tegurid, eriti interleukiin 28B geeni polümorfismid, mõjutavad ravi tulemust, aga ka C-hepatiidi viirusega nakatumise võimalust ise taastuda.

Interleukiin 28B on lambda interferoonide ehk 3. tüüpi interferoonide esindaja, millel on tugev viirusevastane toime ja mis pärsivad C-hepatiidi viiruse replikatsiooni.Uuritud on geeni interleukiin 28B polümorfisme, mis on seotud püsiva viroloogilise vastusega. Teatud genotüüpidega saavutatakse jätkusuutlik viroloogiline reaktsioon 2 korda sagedamini.

C-hepatiidi prognoosi hindamiseks kasutatakse kõige sagedamini kahte peamist polümorfismi: rs12979860 ja rs8099917. Sõltuvalt nende lookuste nukleotiididest tuvastati alleelid C (tsütosiin), T (tüümiin), G (guaniin) ja vastavad genotüübid: rs12979860 alleeli jaoks - CC, CT, TT, samuti TT, TG, GG jaoks. rs8099917 alleelid.

On saadud andmeid, et interleukiini 28B genotüüp on muude prognostiliste tegurite hulgas sõltumatu ja kõige olulisem tegur, mis mõjutab varajase ja püsiva viroloogilise vastuse sagedust AVT-le. Samal ajal vastutavad vastuse saamise eest rs12979860 polümorfismid ja rs8099917 polümorfismid on tihedalt seotud AVT-le reageerimise puudumisega.

Edukamad AVT tulemused saadi patsientidel, kellel oli CC rs1297960 ja TT rs8099917 genotüüp - üle 70%, võrreldes rs1297960 CT ja TT genotüüpidega ning rs8099917 GT ja GG genotüüpidega - ligikaudu 30%.

Interleukiin 28B polümorfismide määramine võimaldab ennustada SVR-i saavutamise tõenäosust tundlikkusega üle 60% ja spetsiifilisusega umbes 80%. Soodsad alleelid on rs1297960 CC ja rs8099917 TT. Kõik teised genotüübid määravad negatiivse prognoosi.

Soodsaid genotüüpe seostatakse sageli suurema põletikulise aktiivsuse ja fibroosi staadiumiga. Lisaks märgiti rs12979860 T polümorfismi seost hepatotsellulaarse kartsinoomi esinemisega. Selle alleeli kandmist peetakse sõltumatuks riskiteguriks koos teiste teadaolevate riskiteguritega.

Interleukiin 28B genotüübi määramine ja muude ebasoodsate prognostiliste tegurite arvessevõtmine viirusevastane ravi võimaldab kohe pärast ravi määramist otsida võimalusi ravi efektiivsuse parandamiseks. Näidati, et interferooni annuse suurendamine 2 korda ebasoodsa interleukiini 28B genotüübiga patsientidel suurendas ravi efektiivsust ja vähendas retsidiivide arvu palju vähem kui ravi kestuse pikendamine 72 nädalani. Lisaks võib soodsa genotüübi ja kiire viroloogilise vastusega patsientidel raviperioode lühendada 24 nädalani.

Seega on interleukiini 28B genotüüpide seos püsiva viroloogilise vastuse saavutamisega märkimisväärne. Interleukiin 28B geeni polümorfismi uurimine koos teiste prognostiliste teguritega võimaldab täpsemalt määrata nakkuse kulgu prognoosi ja ravi efektiivsust. See on oluline samm individuaalse viirusevastase ravi suunas, mis võimaldab teil individuaalselt määrata ravi kestuse ja ravimite annused ning mitte ainult neid suurendada, vaid ka vähendada.

Marker on seotud geneetilise resistentsusega viirusnakkuste suhtes ja kroonilise C-hepatiidi ravi efektiivsusega ribaviriini (Rebetol) ja PEG-interferooniga (PegIntron).

Geeni nimi

IL28B OMIM - *607402

Geeni lokaliseerimine kromosoomis

Geeni funktsioon

IL28B geen kodeerib interferoon-lambda-3 valku, mis on II klassi tsütokiini retseptori ligand. IL28B käivitab JAK/STAT signaalikaskaadi, mis edastab ekstratsellulaarsete polüpeptiidide signaalide informatsiooni sihtgeenide promootoritele, blokeerides viirusvalkude sünteesi.

Geneetiline marker rs12979860

DNA piirkond IL28B geeni regulatoorses piirkonnas, milles nukleotiidtsütosiin (C) on asendatud tümiiniga (T), on tähistatud geneetiliseks markeriks g.39738787C>T või rs12979860.

Rs12979860 on NCBI andmebaasi järgi ühe nukleotiidi polümorfismi tähistus.

Võimalikud genotüübid

Esinemissagedus populatsioonis

Väikese (T) alleeli esinemissagedus Euroopa elanikkonnas on 32%.

Markeri seos haigustega

Marker on seotud geneetilise resistentsusega viirusnakkuste suhtes ja kroonilise C-hepatiidi ravi efektiivsusega ribaviriini (Rebetol) ja PEG-interferooniga (PegIntron). IL28B polümorfism määrab nii viiruse spontaanse eliminatsiooni tõenäosuse kui ka vastuse viirusevastasele ravile. Analüüs määratakse:

Enne kroonilise C-hepatiidi ravi alustamist - ravivastuse ennustamine;

Kroonilise C-hepatiidi ravi taktika valimisel.

Kirjeldus

C-hepatiidi viirus levib peamiselt vere kaudu. See mõjutab umbes 3% maailma elanikkonnast. Nakkus põhjustab ägedat hepatiiti ja seda iseloomustab piisava immuunvastuse puudumine. 50-80% juhtudest läheb see üle krooniline vorm ja põhjustab maksatsirroosi ja hepatotsellulaarset kartsinoomi.

Praegu kasutatakse C-hepatiidi viirusevastase ravina (AVT) kõige sagedamini kahe ravimi, interferoon-alfa ("PEG-interferoon") ja ribaviriini kombinatsiooni, mida kinnitavad rahvusvahelised uuringud ja kliiniline praktika.

Viirusevastase ravi peamine eesmärk on maksatsirroosi ja hepatokartsinoomi ennetamine. Kroonilise viirushepatiidi C ravikuur kestab 16-72 nädalat. Sellisega pikaajaline kasutamine Nendest ravimitest areneb mitmeid väljendunud kõrvalmõjud nii et mõnel juhul tuleb ravi katkestada. Viirusevastase ravi efektiivsus sõltub paljudest teguritest: viiruse genotüüp, viiruse algkoormus, infektsiooni kestus, raua metabolism organismis, transaminaaside aktiivsus, ülekaal, maksa steatoos, insuliiniresistentsus, vanus, sugu, alkoholi- ja ravimisõltuvus, kaasnevad haigused, raske fibroosi olemasolu.

Püsiva viroloogilise vastuse saavutamine ja riskihindamine kõrvaltoimed vastuvõtus viirusevastased ravimid patsiendile väga oluline. Hiljuti kasutatakse esialgse või korduva AVT efektiivsuse hindamiseks individuaalset geneetilist tegurit - IL28B geeni staatust. Sellel on suurim diagnostiline väärtus viiruse 1. genotüübist põhjustatud CHC ravis. 2. ja 3. viiruse genotüübi poolt põhjustatud HCV puhul on IL28B geeni polümorfism oluline ainult patsientidel, kes ei ole saavutanud kiiret viroloogilist vastust (C-hepatiidi viiruse RNA puudumine 4. ravinädalal).

IL28B genotüüpide jaotus on erinevates populatsioonides üle maailma erinev ja selgitab erinev efektiivsus viirusevastane ravi PEG-interferooni ja ribaviriiniga etnilistes rühmades.

Kui patsiendil tuvastatakse CC genotüüp, täheldatakse järgmist:

• SVR-i tekke tõenäosuse suurenemine HTP-s kaks-kolm korda;
• viiruskoormus (viiruse hulk veres) enne ravi on suurem kui TT ja CT alleelide kandjatel.

CC genotüüp tuvastatakse peamiselt inimestel, kellel on nakkus spontaanselt taandunud.

C/T ja T/T genotüübiga patsiente iseloomustab AVT-le reageerimise tõenäosuse vähenemine, st ravi madal efektiivsus.

Tulemuste tõlgendamine

• C/C – viirusevastase ravi efektiivsuse suur tõenäosus
• S/T või T/T – viirusevastase ravi efektiivsuse väike tõenäosus

Uuringu tulemusi tõlgendab arst koos teiste geneetiliste, anamnestiliste, kliiniliste ja laboratoorsete andmetega.

Diagnostiline väärtus

Kuna geeni IL28B kohta on teada mitmeid markereid, mis paiknevad geeni regulatoorses piirkonnas ja määravad selle töö iseloomu, on soovitatav uuring läbi viia kombinatsioonis markeriga rs8099917.

Olulised märkused

Selle markeri jaoks puudub mõiste "norm" ja "patoloogia", kuna geeni polümorfismi uuritakse.

Diagnostikakeskuses: biomaterjali võtmine või isekogumine toimub diagnostikakeskuses.

Üksinda: biomaterjali kogumise viib läbi patsient ise (uriin, väljaheited, röga jne). Teine võimalus - biomaterjali proovid annab patsiendile arst (näiteks operatsioonimaterjal, tserebrospinaalvedelik, biopsia proovid jne). Pärast proovide saamist saab patsient need kas iseseisvalt diagnostikakeskusesse toimetada või helistada mobiilse kodu teenusele, et need laborisse toimetada.

Nagu viimaste aastate uuringud on näidanud, mõjutavad geneetilised tegurid, eriti interleukiin 28B geeni polümorfismid, eriliselt ravitulemust, aga ka infektsiooni korral enesetaastumise võimalust.

Interleukiin 28B on lambda interferoonide ehk 3. tüüpi interferoonide esindaja, millel on tugev viirusevastane toime ja C-hepatiidi viiruse replikatsiooni pärssimine Uuriti püsiva viroloogilise vastusega seotud interleukiin 28B geeni polümorfisme. Teatud genotüüpide puhul saavutatakse püsiv viroloogiline vastus 2 korda sagedamini.C-hepatiidi nakkuse puhul mängivad peamist rolli kaks üksikut nukleotiidi asendust:

Tsütosiini ja tümiini asendus (C>T) tähistatud riikliku biotehnoloogiateabe keskuse (NCBI) dbSNP andmebaasis rs12979860.

Guaniini (T>G) asendamine tümiiniga, tähisega rs8099917

Sõltuvalt nukleotiididest neis lookustes tuvastati alleelid C (tsütosiin), T (tüümiin), G (guaniin) ja vastavad genotüübid: rs12979860 alleeli jaoks - CC, CT, TT, samuti TT, TG, GG jaoks. rs8099917 alleelid. et interleukiin 28B genotüüp on sõltumatu ja kõige olulisem tegur, mis mõjutab teiste prognostiliste tegurite hulgas varajase ja püsiva viroloogilise vastuse sagedust AVT-le (viirusevastane ravi). Samal ajal vastutavad vastuse saamise eest rs12979860 polümorfismid, ja rs8099917 apolümorfismid on tihedalt seotud AVT-le reageerimise puudumisega.Sellest lähtuvalt soovitatakse ravi ettevalmistamisel läbi viia uuringud järgmise algoritmi järgi.

Patsiendi genotüübi määramine IL28B abil võib muuta raviotsuse algoritmi, muutes nii standardse PEG IFN/RIB ravikuuri kui ka CHC kolmikravi kestust. Ravi optimeerimine väldib paljusid lisaprobleeme patsientide ravis, kellel on suure tõenäosusega positiivne ravivastus (vältimaks täiendavaid kõrvaltoimeid ja lisakulusid kolmikravi, sealhulgas proteaasi inhibiitorite - telapreviir ja botsepreviir) korral.

Patsiendi genotüübi määramine IL28B abil võib muuta raviotsuse algoritmi, muutes nii standardse PEG IFN/RIB ravikuuri kui ka CHC kolmikravi kestust. Ravi optimeerimine väldib paljusid lisaprobleeme patsientide ravis, kellel on suure tõenäosusega positiivne ravivastus (vältimaks täiendavaid kõrvaltoimeid ja lisakulusid kolmikravi, sealhulgas proteaasi inhibiitorite - telapreviir ja botsepreviir) korral.

2

1 FBUN "Föderaal teaduskeskus Rospotrebnadzori ennetavad terviseriskide juhtimise tehnoloogiad”

2 GBOU VPO "Permi osariik meditsiiniakadeemia neid. ak. E.A. Wagner" Venemaa tervishoiuministeeriumist

3 Riigi Terviseasutus "Regionaalne Kliiniline Nakkushaigla"

Uuringu eesmärk. Uurida seoseid tsütolüüsi, kolestaasi, fibroosi, maksa regeneratsiooni ja interleukiin 28B (IL28B) geeni polümorfismi laboratoorsete markerite vahel rs12979860 piirkonnas kroonilise C-hepatiidi (CHC) patsientidel. Materjalid ja meetodid. Uuriti 100 CHC patsienti ja 90 tervet doonorit. Vereseerumis hinnati polümeraasi ahelreaktsiooniga maksafunktsiooni analüüse, hüaluroonhappe, alfa-fetoproteiini kontsentratsiooni ensüümi immuunanalüüsiga, viiruskoormuse taset ja IL28B geeni polümorfismi (rs12979860). Tulemused. CHC-ga patsientidel tuvastati tsütolüüsi ja kolestaasi sündroomid ning hüaluroonhappe ja alfafetoproteiini keskmine kontsentratsioon oli enam kui 2 korda kõrgem kui nende näitajate tase kontrollrühmas (p = 0,004 ja p = 0,0001). Üldiselt ei olnud IL28B (rs12979860) genotüüpide ja alleelide sagedustes statistiliselt olulist erinevust tervete isikute ja CHC-ga patsientide rühmade vahel. Sellegipoolest oli 71,4% hepatiidiga patsientidest CT ja TT genotüüpide ebasoodne kombinatsioon ja seega potentsiaalne risk negatiivse vastuse tekkeks viirusevastasele ravile, mille maksimaalne manifestatsioon TT homosügootides. Korrelatsioonianalüüsis näitas IL-28B geeni väike alleel T olulisi seoseid alaniini (r = 0,25, p = 0,02) ja asparagiinhappe (r = 0,22, p = 0,019) transaminaasidega, otsese bilirubiiniga (r = 0,019, 25). , p = 0,02), hüaluroonhape (r = 0,17, p = 0,03), alfa-fetoproteiin (r = 0,25, p = 0,02), viiruskoormus (r = 0, 25, p = 0,021). Järeldus. IL-28B geeni polümorfismi seostatakse CHC patsientide maksakahjustuse raskusastmega.

krooniline C-hepatiit

interleukiini 28B geeni polümorfism

tsütolüüsi sündroom

kolestaas

hüaluroonhape

alfa-fetoproteiin

1. Abdurahhmanov D.T. Kroonilise C-hepatiidi ravi väljavaated // Kliiniline hepatoloogia. - 2010. - nr 3. - Lk 3–9.

2. Simankova T.V., Garmash I.V., Arisheva O.S., Manukhina N.V. IL-28B geeni polümorfism kui kroonilise C-hepatiidi viirusevastase ravi vastuse ennustaja. Klin. pharmacol. ter. - 2012. - nr 21 (1). – Lk 17–22.

3. Shchekotova A.P. Endoteeli düsfunktsiooni ja maksafibroosi markerite vastastikune seos viiruskoormusega kroonilise viirushepatiidi C korral // Kaasaegsed küsimused teadus ja haridus (elektrooniline ajakiri). 2012. Nr 1. URL: www.science-education.ru/101-5458.

4. Agúndez J.A., García-Martin E., Maestro M.L., Cuenca F., Martínez C. jt. IL28B geeni polümorfismi seos C-hepatiidi viirusest põhjustatud maksahaiguse biokeemiliste ja histoloogiliste tunnustega. http://www.plosone.org/article/info:doi/10.1371/journal.pone.0037998.

5. Eurich D., Boas-Knoop S., Bahra M., Neuhaus R., Somasundaram R., Neuhaus P., Neumann U., Seehofer D. IL28B polümorfismi roll C-hepatiidi viirusest põhjustatud hepatotsellulaarse kartsinoomi tekkes , siiriku fibroos ja siirdamisjärgne viirusevastane ravi. Siirdamine/ 2012 27. märts;93(6):644–9.

6. Ge D., Fellay J., Thompson A. IL28B geneetiline varieeruvus ennustab C-hepatiidi ravist põhjustatud viiruse kliirensit // Loodus. 2009 Vol. 461. lk. 399–401.

7. McCarthy J., Li J., Thompson A. Replitseeritud seos IL28B geenivariandi ja püsiva vastuse vahel pegüleeritud interferoonile ja ribaviriinile // Gastroenteroloogia. 2010 Vol. 138. lk. 2307–2314.

8. Moliner L., Pontisso P., De Salvo G.L. et al. Seerumi ja maksa HCV RNA tase kroonilise C-hepatiidiga patsientidel: korrelatsioon kliiniliste ja histoloogiliste tunnustega // Soolestik. 1998. Vol. 42. lk. 856–860.

9. Perz J., Armstrong G., Farrington L. B-hepatiidi viiruse ja C-hepatiidi viirusnakkuste panus tsirroosi ja esmase maksavähi tekkesse kogu maailmas // J. Hepatol. 2006 kd. 45 lõige 4. rr. 529–538.

10. Statermayer A.F., Stauber R., Hofer H., Rutter K. jt. IL28B genotüübi mõju varajasele ja püsivale viroloogilisele vastusele kroonilise C-hepatiidiga varem ravimata patsientidel. Kliiniline gastroenteroloogia ja hepatoloogia. 2011. V. 4. Nr 3. http://health.elsevier.ru / ajakirjad.

11. Thomas D.L., Thio C.L., Martin M.P. IL28B geneetiline varieeruvus ja C-hepatiidi viiruse spontaanne kliirens // Loodus. 2009 Vol. 461 (7265). rr. 798–801.

Viiruslik C-hepatiit on üks sotsiaalselt olulisi haigusi ja üks peamisi põhjuseid krooniline haigus maks. WHO hinnangul on maailmas C-hepatiidi viirusega (HCV) nakatunud 170 miljonit inimest ehk 3% elanikkonnast. Praegu on kroonilise C-hepatiidi (CHC) viirusevastase ravi "kuldstandardiks" pegüleeritud interferoon kombinatsioonis ribaviriiniga. Kombineeritud viirusevastane ravi annab stabiilse viroloogilise vastuse keskmiselt 50-60% kroonilise C-hepatiidiga patsientidest, sealhulgas 40-50% HCV genotüübiga 1 ja 70-80% genotüübiga 2 ja 3. Individuaalne lähenemine ravile, kõrvalnähtude õigeaegne ennetamine ja korrigeerimine suurendab ravi efektiivsust, kuid peaaegu 40% juhtudest on viirusevastane ravi ebaefektiivne. Ilmunud on geneetiline marker, mis võimaldab osaliselt ennustada selle tulemust: interleukiin 28B (IL28B) geeni polümorfism määrab teatud määral tundlikkuse. immuunsussüsteem patsiendi interferooni stimuleerimine.

2009. aastal on D. Ge jt. leidis 19. kromosoomil IL28B-s ühe nukleotiidi asendus, mis lokaliseerimist arvesse võttes nimetati rs12979860. Sõltuvalt selles lookuses paiknevast lämmastiku alusest eraldati 2 alleeli: rs12979860 C (tsütosiin) ja rs12979860 T (tüümiin). Alleelide kombinatsiooni põhjal on võimalikud 3 IL28B geeni polümorfismi genotüübilist varianti: CC, CT ja TT. Sõltuvalt esinemissagedusest populatsioonis on rs12979860 C alleel peamine; esineb sagedamini ja rs12979860 T alleel on väike. On tõestatud, et positiivse vastuse sagedus viirusevastasele ravile on kõrgem rs12979860 CC genotüübiga patsientidel (70,5%) ja madalam rs12979860 CT ja TT genotüübiga patsientidel (vastavalt 32,0% ja 23,3%). T-alleeli kandmine, mis suurendab viirusevastasele ravile negatiivse vastuse tõenäosust, on suurem väärtus kui C-alleeli “kaitseefekt”.Sellele vaatamata aitab CC genotüüp kaasa viiruse eliminatsioonile. IL28B geeni polümorfismi määramine võimaldas ennustada püsiva viroloogilise vastuse saavutamise tõenäosust tundlikkusega 65% ja spetsiifilisusega 78% selle geeni markeri rs12979860 puhul.

Selle markeri geneetilise polümorfismi määramine on HCV 1. genotüübiga patsientide jaoks kõige olulisem, arvestades madalamat ravivastuse määra standardsele viirusevastasele ravile. Mõned uuringud ei ole nendel patsientidel leidnud selget seost IL28B polümorfismi ja püsiva viroloogilise vastuse määra vahel. IL28B genotüübi määramine on väga oluline võimaliku ravivastuse hindamisel viirusevastasele ravile ja patsientide valimiseks, kes võivad lühematest ravikuuridest kasu saada. Üldiselt on IL28B polümorfism üks tegureid, mis võimaldavad kroonilise C-hepatiidi ravi individualiseerida. Kirjanduses on tõendeid selle kohta, et IL28B geeni polümorfism on seotud HCV-indutseeritud hepatotsellulaarse kartsinoomi tekkega. Seega tundub huvitav uurida selle geeni polümorfismi seost maksakahjustuse raskusastmega, eriti ebanormaalsete maksafunktsiooni testide, fibroosi ja maksa regeneratsiooni laboratoorsete testidega, mis aitavad selgitada IL28B polümorfismi rolli patogeneesis ja CHC progresseerumine.

Uuringu eesmärk oli uurida tsütolüüsi, kolestaasi, hüaluroonhappe (HA), alfa-fetoproteiini (AFP), viiruskoormuse (VL) ja IL28B geneetilise polümorfismi laboratoorsete markerite seost CHC patsientidel rs12979860 piirkonnas.

Uurimistöö materjalid ja meetodid

Uurisime 100 CHC-ga reaktivatsioonifaasis patsienti, kes hospitaliseeriti Permi piirkondlikku nakkushaigustesse. kliiniline haigla kombineeritud viirusevastase ravi alustamiseks. Patsientide keskmine vanus oli 38,3 ± 10,4 aastat, kellest 48 olid mehed ja 52 naised. Diagnoosi etioloogiline kontrollimine viidi läbi kvalitatiivse ja kvantifitseerimine HCV RNA patsientide veres, kasutades polümeraasi ahelreaktsiooni (PCR), samuti HCV seroloogilisi markereid. HCV genotüübi järgi jaotati CHC-ga patsiendid järgmiselt: genotüüp 1 määrati 56% patsientidest, genotüüp 2 ja 3 - 44%. Sooliselt sobitatud kontrollrühma kuulus 90 näiliselt tervet (doonorit) indiviidi, kelle keskmine vanus oli 36,3 ± 7,9 aastat ilma maksahaiguseta.

Vere seerumi biokeemilised parameetrid määrati automaatse analüsaatoriga "Architect-4000" (USA). HA – maksafibroosi otsese markeri – taset vereseerumis hinnati BCM Diagnostics komplekti abil ensüümi immuunanalüüsi abil Stat-Fax analüsaatoril (USA) 76 patsiendil. AFP kontsentratsiooni vereseerumis uuriti immunokemiluminestsentsanalüüsiga, kasutades AFP komplekti (Siemens) Immulite-1000 analüsaatoril (Saksamaa) 44 patsiendil. Kontrollrühmas uuriti HA ja AFP kontsentratsiooni 20 praktiliselt tervel inimesel.

IL28B geeni rs12979860 markeri polümorfsete variantide tuvastamiseks kasutati alleelispetsiifilist PCR-i koos toote reaalajas tuvastamisega. Praimerite ja sondide projekteerimise viisid läbi CJSC Syntol (Moskva) töötajad. (USA). Selle geeni genotüüpide määramiseks kõigil CHC-ga patsientidel ja 90 tervel doonoril eraldati DNA tervest venoosne veri, eelstabiliseeritud EDTA-ga.

Saadud tulemuste statistiline töötlemine viidi läbi programmi Statistica 7.0 (StatSoft) abil. Tulemuste jaotust kontrolliti Kolmogorovi–Smirnovi kriteeriumi järgi. Saadud kvantitatiivsete karakteristikute kirjeldamiseks esitati andmed mediaanina (Me) ning 25. ja 75. protsentiili, miinimumi (min) ja maksimumina (max). Kuna GA ja AFP väärtuste jaotus erines normaalsest, kasutati sõltumatute rühmade vaheliste erinevuste olulisuse hindamiseks mitteparameetrilist Mann-Whitney testi. Genotüüpide ja geenide alleelide sageduste suhte kirjeldamiseks kasutati Hardy-Weinbergi tasakaalu. Uuritud rühmad olid uuritava geeni genotüübi sageduste poolest tasakaalus (stabiilses) seisundis (p > 0,05). Erinevused kahes populatsioonis arvutati koefitsientide suhte (OR) abil, kasutades juhtumikontrolli meetodit erinevate pärimismustrite jaoks: aditiivne, tavaline, korduv, domineeriv ja retsessiivne, ning neid peeti oluliseks p juures.< 0,05. Количественная оценка линейной связи между двумя независимыми величинами определялась с использованием коэффициента ранговой корреляции по Спирмену (r). Значимость взаимосвязей и различия между выборками считались достоверными при значении для р < 0,05.

Uurimistulemused ja arutelu

Võttes arvesse biokeemilised näitajad veres CHC-ga patsientidel tuvastati tsütolüüsi sündroom, mida iseloomustas alaniini (ALT) ja asparagiinhappe transaminaaside (AST) aktiivsuse tõus vereseerumis, mesenhümaalne põletikuline sündroom (kõrgenenud tümooliproov) ja kolestaasi sündroom ( leeliselise fosfataasi, otsese bilirubiini aktiivsuse suurenemine).

CHC-ga patsientide rühmas täheldati suurenenud HA sisaldust, mis peegeldab fibroosi aktiveerumist krooniline põletik maks, samas kui HA mediaankontsentratsioon veres oli kontrollrühma indikaatori tasemest 2 korda kõrgem (p = 0,01) (tabel 1). AFP kontsentratsioon hepatotsüütide regeneratsiooni markerina CHC patsientidel oli samuti oluliselt kõrgem kui kontrollrühmas.

CHC-ga patsientide vireemia näitas VL suuri erinevusi. VL tase 70% patsientidest oli kõrge – üle 2∙106 koopia/ml, 30% juhtudest madal – alla 2∙106 koopia/ml. Samal ajal oli minimaalne vireemia 0,022∙106, maksimaalne - 8800∙106 koopiat/ml. CHC taasaktiveerimise ajal uuritud vireemia varieeruvus on kooskõlas kirjanduse andmetega.

Tabel 1

Hüaluroonhape ja alfa-fetoproteiin CHC patsientidel ja kontrollrühmas

Märge. p - näitaja erinevuste olulisus uuritud rühmades arvutati Mann-Whitney testi abil.

Käesolevas uuringus analüüsisime ühe nukleotiidi asendust (SNP) IL-28B geenis (rs12979860) 190 isikul (90 doonorit ilma kroonilised haigused maksa ja 100 CHC-ga patsienti).

Alleeli C (CC) homosügootide levimus tervete ja CHC-ga patsientide rühmas oluliselt ei erinenud (χ2 = 0,61; p = 0,44) ning moodustas vastavalt 42 ja 36% (joonis). Patoloogiliste TT homosügootide esinemissagedus tervete ja CHC patsientide rühmas oli vastavalt 6% ja 8% (χ2 = 0,35; p = 0,55). Mõlemas rühmas domineerisid ST heterosügootid (χ2 = 0,79; p = 0,67). Ka uuritud markeri alleelisageduste suhet uuritud rühmades ei iseloomustatud erinevusega. Patoloogilise väiksema alleeli T esinemissagedus CHC rühmas oli 36%, kontrollrühmas 32% (χ2 = 0,64; p = 0,42). Saadud tulemused IL-28B (rs12979860) genotüüpide ja alleelide esinemise kohta nii tervetel inimestel kui ka CHC rühmas elanikkonna hulgas Permi territoorium praktiliselt ei erine teiste autorite andmetest. Eelkõige Venemaal on kaitsva alleeli C levimus elanikkonnas 61–64%, meie uuringutes - 64% CHC-ga patsientidel ja 61% kontrollrühmas. Seega ei leitud uuringu käigus statistiliselt olulist erinevust IL-28B markeri (rs12979860) genotüüpide ja alleelide sagedustes tervete ja CHC-ga indiviidide rühmade vahel. CHC-ga patsientide rühmas oli riskialleeli T esinemissagedus 0,359, mis ei erinenud oluliselt selle esinemissagedusest 0,319 tervete inimeste seas. 56-st HCV-1-ga nakatunud patsiendist oli 40 inimesel rs12979860 CT ja TT genotüüpide ebasoodne kombinatsioon (vastavalt 35 ja 5), ​​mis erines oluliselt kontrollrühmast (χ2 = 4,55; p = 0,03). Seega oli potentsiaalne risk ebastabiilse viroloogilise vastuse tekkeks HCV genotüübiga 1 71,4%.

IL-28B geeni (rs12979860) polümorfismi genotüüpide ja alleelide levimus CHC patsientidel ja kontrollrühmas

Korrelatsioonianalüüsis näitas IL-28B geeni väike alleel T (rs12979860) olulisi seoseid funktsionaalsete maksaanalüüsidega: ALT, AST, üld- ja otsebilirubiin, mis näitab seost geeni polümorfismi ja maksakahjustuse raskusastme vahel. Need andmed viitavad ka tsütolüüsi ja kolestaasi raskusastme ebasoodsale mõjule viirusevastase ravi prognoosile (tabel 2). Saadud tulemused on kooskõlas Agundez J.A. uuringu andmetega. et al. (2009), kes paljastas geenide polümorfismi seose ALT, gamma-glutamüültranspeptidaasi, AST/ALT suhtega.

tabel 2

IL-28B geeni väiksema alleeli T (rs12979860) seosed maksa funktsionaalsete testide, hüaluroonhappe ja alfafetoproteiiniga CHC-s

Märkused: r - näitajate seos; p on korrelatsiooni olulisus.

Positiivne märkimisväärne korrelatsioon T-alleeli ja HA vahel näitab, et uuritavat geeni saab hinnata maksafibroosi progresseerumise tegurina. Korrelatsioon AFP-ga viitab ka geenipolümorfismi seosele väljendunud maksakahjustuse ja hepatokartsinoomi riskiga. Eurich D. et al. (2012) leidsid seose IL-28B ja AFP vahel CHC-ga seotud hepatokartsinoomi korral ja fibroosi progresseerumisega HCV infektsiooniga patsientidel pärast maksa siirdamist. T-alleeli seos VL tasemega võib viidata raskemale hepatotsüütide kahjustusele CHC-ga patsientidel, mis on kooskõlas HA ja vireemia astme vahelise seosega. Üldiselt näitavad T-geeni väiksema alleeli tuvastatud seosed uuritud testidega tõsiasja, et IL-28B geneetiline polümorfism võib realiseeruda kaudselt mitmete parameetrite kaudu, mis on seotud CHC patogeneesiga ja mõjutavad viirusevastase ravimi efektiivsust. teraapia. Nende tegurite hulka kuuluvad tsütolüüsi ja kolestaasi sündroomide esinemine, maksafibroosi raskusaste, hepatotsüütide regeneratsiooni aktiveerimine ja VL tase.

Seega on IL-28B geeni (rs12979860) polümorfism seotud CHC-ga patsientide maksakahjustuse raskusastmega, mida tuleb nende tegurite ebasoodsa kombinatsiooni korral ravi optimeerimise üle otsustamisel arvesse võtta, eriti väiksema T-alleeliga patsientidel.

1. Reaktivatsioonifaasis CHC-ga patsientidel tuvastati HA ja AFP tõus, mis viitab fibroosi aktiveerumisele ja regeneratsioonile maksas.

2. Uuringu käigus ei leitud statistiliselt olulist erinevust IL-28B geeni (rs12979860) genotüüpide ja alleelide esinemissageduses tervete indiviidide rühmade ja erinevate viiruse genotüüpidega CHC-ga patsientide vahel.

3. 71,4%-l HCV-1-ga nakatunud patsientidest esines rs12979860 CT ja TT genotüüpide ebasoodne kombinatsioon ning sellest tulenevalt ka potentsiaalne risk negatiivse vastuse tekkeks viirusevastasele ravile koos selle maksimaalse avaldumisega TT homosügootides.

4. Kroonilise C-hepatiidiga patsientidel leiti seos IL-28B geeni väiksema alleeli T (rs12979860) ning tsütolüüsi ja kolestaasi sündroomide raskusastme, maksafibroosi ja regeneratsiooni markerite ning vireemia taseme vahel. .

5. HCV 1. genotüübiga CHC-ga patsientidel on viirusevastase ravi prognoosi määramiseks ja ravi optimeerimise probleemi lahendamiseks vaja hinnata tegurite kombinatsiooni: tsütolüüsi ja kolestaasi raskusastet, HA kontsentratsiooni, AFP ja vireemia esialgne tase, eriti patsientidel, kellel on IL-28B geeni väike alleel T.

Arvustajad:

Ustinova O.Yu., meditsiiniteaduste doktor, professor, meditsiinitöö asedirektor, FBSI "Rahvastiku terviseriski juhtimise meditsiini- ja ennetustehnoloogiate föderaalne teaduskeskus", Perm;

Gein S.V., MD, saatejuht Uurija Mikroorganismide arengu biokeemia labor, Mikroorganismide ökoloogia ja geneetika instituut, Venemaa Teaduste Akadeemia Uurali filiaal, Perm.

Töö jõudis toimetusse 16.12.2013.

Bibliograafiline link

Bulatova I.A., Krivtsov A.V., Shchekotova A.P., Larionova G.G., Shchekotov V.V. MAKSAKAGASTUSTE RASEDUSE SEOS GEENI INTERLEUKIIN 28B POLÜMORFIMISEGA KROONILISE HEPATIIT C-GA PATSIENTIL // Fundamental Research. - 2013. - nr 12-2. - S. 186-190;
URL: http://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=33301 (juurdepääsu kuupäev: 01.02.2020). Juhime teie tähelepanu kirjastuse "Looduslooakadeemia" poolt välja antud ajakirjadele