süüfilis- krooniline suguhaigus, mida iseloomustab haiguse üksikute perioodide järjestikune muutumine. See oli süüfilise põhjustaja. avastas 1905. aastal saksa teadlane Shaudin.

Morfoloogia ja bioloogilised omadused. Treponema pallidum on 15x0,25-0,5 µm suurune õhuke keerdniit, millel on üksteise lähedal 8-14 ühtlast spiraali keerdu. Aniliinvärvidega on raske värvida ja sai seetõttu kahvatu spiroheedi nime. Värvimiseks kasutatakse Romanovsky-Giemsa meetodit (spiroheedid värvitakse kahvaturoosa värviga), negatiivset värvimist tindilahusega (spiroheedid jäävad värvimata ja on nähtavad tumedal taustal). Nakatunud kudedes spiroheetide tuvastamiseks kasutatakse hõbeda immutusmeetodit (Levaditi meetod), mille puhul on kollase koerakkude taustal nähtavad mustaks määrdunud treponeemid. Materjali uurimisel pimedas vaateväljas erineb kahvatu spiroheet suuõõne ja suguelundite limaskestadel leiduvatest saprofüütsetest spiroheetidest, ühtlased lokid, sujuvad lainelised liigutused.

See on õhem kui teised treponeemid, on võimeline painduma nurga all ja sooritama iseloomulikke pendli liigutusi. Süüfilise tekitajat kultiveeritakse raskesti anaeroobsetes tingimustes. Kasvatamiseks kasutatakse küüliku või hobuse seerumit sisaldavat söödet (Ulengut ja Tersky sööde). Samal ajal kaotavad kultuurilised (toitekeskkonnast saadud) spiroheedi tüved oma virulentsuse ja muudavad oma antigeenset struktuuri. Treponeemid sisaldavad endotoksiini ja neil on keeruline antigeenne struktuur.

Jätkusuutlikkus. Kahvatu spiroheet väljaspool patsiendi kudesid sureb kiiresti, on kuivatamisel ebastabiilne, tavaliste desinfektsioonivahendite toime ja kõrge temperatuur; isegi 40°C juures sureb 2 tunni pärast.Madalatele temperatuuridele on vastupidavam: talub külmumist kuni aasta.

Patogeensus. AT vivo Loomad süüfilist ei haigestu. Katseliselt õnnestub nakatada ahve, küülikuid, hamstreid.

Patogenees ja kliinik. Nakkuse sissepääsu väravad on limaskestad ja nahk, millel on kõige väiksemad kahjustused. Inkubatsiooniperiood kestab keskmiselt 3-4 nädalat, pärast mida algab süüfilise esmane periood: patogeeni sissetoomise kohas tekib kerge erosioon, mis on tõusnud naha kohale, siledate servadega, sileda, läikiva põhjaga. , roosa või punane, sageli valutu, põhjas tiheda infiltratsiooniga, mille tõttu sai ta nime "kõva šankre". Halb enesetunne, peavalu. Lümfisõlmed suurenevad, muutuvad tihedaks ilma nähtavate põletikunähtudeta. Tavaliselt ei joodeta neid ümbritsevate kudede külge. 20-30 päeva pärast kõva šankre paraneb.

Spirochetes alates lümfisõlmed tungida verre, paljuneda ja siseneda elunditesse ja kudedesse ning põhjustada nende kahjustusi. Pärast 6-7 nädala möödumist haiguse algusest areneb süüfilise sekundaarne periood, mida iseloomustab protsessi üldistamine ning rohkete ja mitmekesiste roosade või punaste toonide löövete ilmnemine nahal ja limaskestadel (syphilides). võib esineda roseooli, papulite, vesiikulite, pustulite kujul. Kui ravi ei toimu, algab 2-3 aasta pärast süüfilise kolmas periood - kummiline. On tuberkuloosne süüfilis ehk sügav nodulaarne süüfilis (subkutaanne igeme). Nahale ja limaskestadele tekivad tihedad sfäärilised mugulad. Need võivad eksisteerida lõputult ja seejärel taanduda või haavanduda, millele järgneb armistumine. Süüfilise kummi moodustumisel tekib nahaalusesse rasvkoesse sõlm, mis suureneb, joodab ümbritseva koe ja nahaga. Igeme keskosa kohal muutub nahk õhemaks ja see avaneb. Kumm muutub igemehaavandiks koos halb lõhn: selle põhi on kaetud nekrootilise lagunemisega. Mõne kuu jooksul haavand paraneb ja selle asemele jääb tagasitõmbunud tähtarm. Viimasel, neljandal, parasüfiliitilisel perioodil, mis võib tekkida 10-20 aastat pärast haiguse algust, on spetsiifilised tsentraalse kahjustused. närvisüsteem progresseeruva halvatuse või dorsaalsete tabide kujul.

Immuunsus. Puudub loomulik, kaasasündinud immuunsus: nakatumine viib alati haiguse arenguni. Omandatud immuunsuse seisundi küsimust ei mõisteta täielikult. Haiguse ajal tekib mittesteriilne immuunsus, millel on rakulise koe iseloom. Seda nimetatakse anti-chankeriks, kuna haiguse ajal uuesti nakatumisel uut šankrit ei teki ja spiroheedid levivad kogu kehas, osaledes järgnevate süüfilise kahjustuste tekkes.

Mikrobioloogiline diagnostika. Põhimeetodid laboratoorne diagnostika- mikroskoopiline ja seroloogiline. Esimesel perioodil tehakse kõva šankri seroosse sisu mikroskoopia pimedas väljas või Romanovsky-Giemsa järgi värvitud määrdudes. Samuti uuritakse mikroskoopiliselt sekundaarse ja tertsiaarse perioodi nahakahjustuste väljutamist. Alates 5.-6.nädalast nakatumise hetkest või 2-3.nädalal pärast kõva šankri tekkimist kasutatakse seroloogilisi diagnostikameetodeid. Rakendage Kahni ja Sachs-Vitebsky RSK (Wassermanni reaktsioon) ja settereaktsioonid (sadestamisreaktsioonid). Wassermanni reaktsioon viiakse läbi patsiendi seerumiga, kasutades mittespetsiifilisi antigeene (veise südame lipoidide alkohoolne ekstrakt, millele on lisatud kolesterooli või kardiolipiini antigeen), kuna selgus, et süüfilisega patsiendi seerumi globuliinid on võimelised. kombineerida erinevatest elunditest saadud lipoidekstraktidega. Lisaks mittepedilistele antigeenidele kasutatakse spetsiifilist antigeeni, mis saadakse kahvatu treponemaga nakatunud küüliku munandikoest. Hemolüüsi puudumisel loetakse reaktsioon positiivseks, kuna on ilmne, et komplement on seondunud spetsiifilise antigeen-antikeha süsteemiga. Settereaktsioonid on tehnikalt lihtsad. Nende olemus seisneb selles, et kui patsiendi seerumile lisatakse kontsentreeritud lipoidne antigeen, ilmub hägusus ja seejärel sade. Kuna nende reaktsioonide antigeenid on mittespetsiifilised, võivad need olla positiivsed ka muudel juhtudel. nakkushaigused(tuberkuloos, malaaria jne).

kõige spetsiifilisem sisse seroloogiline diagnoos süüfilis on treponema immobilisatsioonireaktsioon (RIT). See reaktsioon põhineb asjaolul, et kui süüfilisega patsiendi seerumit lisatakse treponeemide koekultuurile (kasvatatakse küüliku munasarjas), kaotavad nad komplemendi juuresolekul oma liikuvuse. Koos selle reaktsiooniga kasutatakse ka kaudset Rifi. Selle reaktsiooni lavastamise peamised komponendid on: patsiendi seerum (lahjendatud 1:200), kahvatu spiroheedi koetüvi, liigivastane fluorestseeruv seerum inimese globuliinide vastu.

Ainus nakkusallikas on inimene kõigil haigusperioodidel. Nakkustee on otsekontakt patsiendiga (kõige sagedamini seksuaalvahekorra ajal), harvem majapidamistarvete kaudu. Nakkuse edasikandumine haigelt emalt platsenta kaudu vastsündinule on võimalik.

Ennetamine ja ravi. NSV Liidus anti arstidele ülesanne süüfilis välja juurida. Selleks on olemas kõik eeldused: töötajate heaolu ja kultuurilise elatustaseme pidev kasv, aga ka sellised tõrjemeetmed nagu nakkusallikaks olevate ja haigestunud isikute läbivaatusse ja ravisse kaasamine. nendega kokku puutunud, massilised ennetavad uuringud, dispanseri töömeetodid. Ennetamises mängib olulist rolli nakkusallikate varajane tuvastamine, õigeaegne ravi, promiskuiteedi kõrvaldamine. Spetsiifiline profülaktika ei teostata.

Raviks kasutatakse novarsenooli, vismuti, elavhõbeda, penitsilliini preparaate.

Spiroheetide üldised omadused.

Spirohetoosid - See on spiraalbakterite põhjustatud nakkushaiguste rühm, mida iseloomustab üldine joobeseisund ja liikide tsükliline areng.

Taksonoomia:

Järjestus: Spirochaetales (kreeka keelest speira - curl, chaite - juuksed)

Perekond: Spirochaetaceae, Leptospiraceae

Perekond: Spirochaeta Leptospira

Morfoloogia: pikad, õhukesed, spiraalselt kumerad mikroorganismid, suurusega 0,1-0,3x5-250 mikronit. Keskne struktuur on protoplasmaatiline silinder, mis sisaldab tsütoplasmat, nukleoidi, 70 S ribosoome ja ensüüme, ümbritsetuna tsütoplasmaatilise membraani ja rakuseinaga. Protoplasmaatilisel silindril on peptidoglükaani tõttu püsiv spiraalne kuju, mis moodustab primaarsed pöörised. Nende arv, tüüp, samm ja kaldenurk varieeruvad erinevad tüübid. Teisesed lokid, mis tulenevad kogu keha kumerusest. Spiraalse tsütoplasma silindri ümber paikneb periplasmaatiline lipp (flagella), mille üks ots on kinnitunud protoplasmaatilise silindri ühe pooluse külge ja teine ​​viimase külge ligikaudu raku keskel, vippude arv on alates. 2-100 (üks pool on kinnitatud ühe ja teine ​​teise varda külge). Periplasmaatilised lipukesed keerduvad spiraalselt ümber protoplasmilise silindri, moodustades aksiaalse niidi, mille peal on mitmekihiline välismembraan (spiroheedi väliskest); lipp asub selle ja silindri vahel (periplasmic flagellum ehk endoflagellum).

Erinevused enzoflagellast:

pidevalt ümbritseda raku keha;

paikneb täielikult raku sees;

vähendatakse ümber oma telje pööramise teel translatsiooniliselt ja painduvalt;

säilitavad liikuvuse suhteliselt kõrge viskoossusega keskkonnas.

Eosed ja kapslid ei moodustu. Ebasoodsates tingimustes moodustavad nad palliks voltimise tulemusena tsüstid.

Tinktori omadused: halvasti värvitud animevärvidega, välja arvatud Borrelia, gramnegatiivne, kasutage Morozovi hõbetamismeetodit.

Kultuurilised omadused: nõudlik toitainete söötme suhtes, on vaja lisada looduslikku valku, süsivesikuid, rasvhappeid. Energia salvestamise meetodi järgi eristatakse anaeroobe, fakultatiivseid anaeroobe, mikroaerofiile ja aeroobe. Leptospira ja borrelia optimaalne temperatuur on 28-30 ?C.

Biokeemilised omadused : katalaas-, ureaas-, oksüdaasnegatiivne, Voiges-Proskaueri reaktsioon “-”, ei redutseeri nitraate.

Vastupidavus: oleneb perekonnast ja liigist.

Roll patoloogias .

Treponema on süüfilise, yaws, pint, bejel tekitajad;

Borrelia– epideemiline ja endeemiline puukide kaudu leviv retsidiveeruv palavik, Lyme borrelioos;

Leptospira- leptospiroos.

Spirohetoosi üldised nähud:

tsükliline vool;

patogeeni tuvastamine veres ja kudedes;

mikrobioloogilise diagnostika peamised meetodid: bakterioskoopiline ja seroloogiline.

2. Süüfilise mikrobioloogia.

süüfilis - krooniline nakkuslik suguhaigus, mida iseloomustab laineline kulg, haiguse kliinilise ilmingu vahelduvad aktiivsusperioodid pikkade varjatud perioodidega.

Avastamise ajalugu.

Süüfilise tekitaja tuvastasid 1905. aastal Shaudin ja Hoffman ning nimetasid selle nimeks spirochete pallidum. Wasserman pakkus koos Keisseri ja Brookiga välja seroloogilise testi süüfilise diagnoosimiseks.

Taksonoomia.

Telli Spirochaetales

Perekond: Spirochaetaceae

Perekond: Treponema

Liik: Treponema pallidum

Morfoloogia: spiraalikujulised bakterid suurusega 6-14x0,2-0,3 mikronit, primaarsete lokkide arv on 8-12, mis asuvad üksteisest võrdsel kaugusel; raku otstest ulatuvad kolm periplasmaatilist lipukest. Nad ei moodusta eoseid ega kapsleid, kuid katseloomade kehas suudavad nad sünteesida kapslilaadse kesta mukopolüsahhariidset olemust. Ebasoodsates tingimustes võivad need muutuda tsüstideks, graanuliteks ja tsüstitaolisteks sfäärilisteks kehadeks.

Tinktori omadused: halvasti värvitud aniliinvärvidega, gramnegatiivne, Romanovsky-Giemsa järgi - kergelt roosakas (pallidum - kahvatu), viige läbi Morozovi järgi hõbedamise meetod ja Burri järgi negatiivse kontrasti meetod, mis on kõige tõhusam uuring pimedas -välja- või faasikontrastmikroskoop.

kultuuriväärtused : kohustuslikud anaeroobid, kemoorganoheterotroofid, optimaalne temperatuur on 35°C, temperatuuril üle 40°C kaotavad nad oma elujõulisuse. Toitekeskkonnale väga nõudlik; on vaja lisada neeru, ajukoe või astsiidivedelikku. Toitekeskkonnas kasvatatud treponeemid (“kultuurilised” tüved) muutuvad jämedamaks, lühemaks, polümorfseks, kaotavad oma immunogeensuse ja patogeensuse. Treponeemid kasvavad hästi, kaotamata oma immunogeenseid ja patogeenseid omadusi küülikute munandites, kana embrüodes - "koe" tüvedes, mida kasutatakse patogeeni isoleerimiseks ja uurimiseks patsientidelt.

Biokeemilised omadused : mitteaktiivne, lagundavad glükoosi, galaktoosi, sahharoosi, maltoosi, mannitooli happe moodustumisega; moodustavad indooli ja vesiniksulfiidi, vedeldavad želatiini; redutseerige hõbenitraat metalliliseks hõbedaks, mis annab kangastele musta või tumepruuni värvi.

Antigeenne struktuur : komplekssed välismembraani valgud (termolabiilsed, lagunevad 76-80 °C juures, polüsahhariidid (termostabiilsed); lipoproteiinid, mis on inimestele ja veistele ühised ristreageerivad antigeenid, näiteks kardiolipiini antigeen on lipoproteiinide ekstrakt, mis pärineb inimese südamest pull, kasutatakse seroloogilistes reaktsioonides diagnostikas.

patogeensuse tegurid :

a) toksiinid:

Endotoksiin (rakuseina LPS);

b) patogeensuse ensüüme ei tuvastatud;

c) raku struktuursed ja keemilised komponendid:

flagelladest tingitud motoorika;

adhesiinid;

välismembraani valgud.

Vastupidavus: tundlikud keskkonnategurite, UV-kiirguse, kuivamise, kõrge temperatuuri suhtes (40°C juures kaotavad 1 tund oma patogeensed omadused, 48°C juures surevad 10 minuti pärast); dez. töökontsentratsiooniga lahustel on kahjulik mõju; taluvad madalaid temperatuure (külmas püsivad kuni 50 päeva, külmutatult kuni 1 aasta), täisveres ja seerumis 4 °C juures püsivad elujõulised 24 tundi; tundlik raskmetallide soolade ja antibiootikumide (penitsilliin, erütromütsiin, karbenitsilliin jne) suhtes

Epidemioloogia.

Nakkuse allikas on haige inimene. Bakterikandjat süüfilises ei juhtu.

Edastamise viis:

1) kontakt: a) otsene; b) kaudne.

2) transplatsentaarne (emalt vastsündinule);

3) vereülekanne.

Sissepääsuvärav: suguelundite limaskestad, suuõõne jne, katkine nahk.

Roll ja patoloogiad

Süüfilisesse haigestuvad ainult inimesed. Eksperimentaalselt saate nakatada ahve, küülikuid, hamstreid. Ahvidel moodustub kõva šankre, küülikutel ja hamstritel - üldine krooniline infektsioon.

Treponema pallidum - süüfilise põhjustaja kuulub perekonda Treponema (ladina keelest trepo - turn, nemo - niit).

T. pallidum avastas F. Shaudin 1905. aastal. Suure panuse süüfilise uurimisse andsid I. I. Mechnikov, P. Erlich, D. K. Zabolotny jt.

Morfoloogia. T. pallidum on väikeste ühtlaste lokkidega spiraalne niit mõõtmetega 8-18 × 0,08-0,2 mikronit. Lokkide arv 12-14. Treponema otsad on teravad või ümarad. Treponeemid on liikuvad. Neil on neli liikumistüüpi. Romanovski järgi on Giemsa värvitud kahvaturoosa värviga, nii et neid nimetatakse T. pallidum - kahvatu treponema. Kehv värvumine on tingitud nukleoproteiinide vähesest sisaldusest. Spiroheete saab tuvastada hõbedaga kaetud Burri värvitud preparaatides. Lisaks uuritakse neid elavas olekus – pimedal väljal.

Süüfilise tekitajatel puuduvad eosed ja kapslid (vt joonis 4).

kasvatamine. Kahvatu treponeemid on toitainekeskkonna suhtes väga nõudlikud. Kunstlikel toitainetel kasvavad nad ainult küüliku aju või neerude tükkide ja astsiidivedeliku olemasolul. Kasvab aeglaselt, 5-12 päeva temperatuuril 35-36 ° C anaeroobsetes tingimustes. Kahvatu treponeemid paljunevad hästi tibu embrüos (ristisuunalise lõhustumise teel). Kunstlikul toitainekeskkonnal kasvatamisel kaotavad treponeemid oma virulentsuse. Selliseid kultuure nimetatakse kultuurilisteks. Tibude embrüodes kasvatatud kultuure nimetatakse koekultuurideks. Tavaliselt säilitavad nad virulentsuse.

ensümaatilised omadused treponema ei ole. Kultuuritüved erinevad aga nende võime poolest moodustada indooli ja vesiniksulfiidi.

toksiinide moodustumine. Pole paigaldatud.

Antigeenne struktuur. Kahvatu treponema sisaldab mitmeid antigeenseid komplekse: polüsahhariidi, lipiidi ja valku. Serorühmi ja serovarie ei ole kindlaks tehtud.

Vastupidavus teguritele keskkond . Kahvatu treponeemid on ebastabiilsed. Temperatuur 45-55 ° C hävitab need 15 minuti pärast. Nad on vastupidavad madalatele temperatuuridele. Külmutuna säilivad nad kuni aasta. Spiroheedid on tundlikud raskmetallide soolade (elavhõbe, vismut, arseen jne) suhtes. Tavalised desinfektsioonivahendite kontsentratsioonid tapavad need mõne minutiga. Nad on tundlikud bensüülpenitsilliini, bitsilliini jne suhtes. Teatud keskkonnategurite ja antibakteriaalsete ravimite mõjul võivad treponeemid moodustada tsüste. Sellisel kujul on nad kehas pikka aega varjatud olekus.

Loomade vastuvõtlikkus. Looduslikes tingimustes loomad süüfilisesse ei haigestu. Ahvidel on aga võimalik paljuneda, nagu näitasid I. I. Mechnikov ja E. Roux kliiniline pilt süüfilis: süstekohal moodustub kõva šankre. Nüüdseks on selgunud, et kui küülikud, merisead on nakatunud, tekivad süstekohas või mujal nahale haavandid. Küülikutel käikude juures saab pikka aega päästa isoleeritud treponema tüvi.

Nakkuse allikad. Haige mees.

Edastamise marsruudid. Kodune kontakt (otsene kontakt), valdavalt seksuaalne kontakt. Mõnikord võib süüfilis edasi kanduda esemete (nõud, voodipesu) kaudu. Süüfilisega emalt kandub haigus platsenta kaudu lapsele (kaasasündinud süüfilis).

Patogenees. Sissepääsu väravad on suguelundite ja suuõõne limaskestad.

Esmane periood - spiroheedid sisenevad limaskestale ja pärast inkubatsiooniperioodi (keskmiselt 3 nädalat) moodustub sisseviimise kohas haavand, mida iseloomustavad tihedad servad ja põhi - kõva šankre. Kõva šankri moodustumisega kaasneb lümfisõlmede suurenemine. Esmane periood kestab 6-7 nädalat.

Sekundaarne periood - süüfilise tekitajad levivad lümfi- ja vereringeteede kaudu kogu kehas. Samal ajal tekivad nahale ja limaskestadele roseool, paapulid ja vesiikulid. Selle perioodi kestus on 3-4 aastat.

Kolmas periood - areneb ravimata süüfilisega. Sel perioodil moodustuvad elundites, kudedes, luudes ja veresoontes granuleeritud kasvud - igemed või igemeinfiltraadid, mis on altid lagunemisele. See periood võib kesta mitu aastat (latentses vormis). Patsient sel perioodil ei ole nakkav. Ravimata süüfilise korral (mõnel juhul) võib paljude aastate pärast tekkida kesknärvisüsteemi kahjustus: ajukahjustusega - progresseeruv halvatus, kahjustusega selgroog- selja kuivus. Need haigused tekivad siis, kui treponema lokaliseerub ajukoes, mis põhjustab kehas tõsiseid orgaanilisi ja funktsionaalseid muutusi.

Immuunsus. Loomulik immuunsus puudub. Süüfilisega tekib "mittesteriilne" nakkuslik immuunsus. Seda nimetatakse šankriks, kuna uuesti nakatumise ajal kõva šankre ei teki, vaid arenevad kõik järgnevad perioodid. Süüfilise korral tuvastatakse IgC ja IgM, samuti IgE reaginid, mis kardiolipiidantigeeni juuresolekul seovad komplementi.

Ärahoidmine. Sanitaar- ja kasvatustöö, süüfilisehaigete varajane avastamine. spetsiifiline profülaktika. Ei arendatud.

Ravi. Penitsilliin, bitsilliin, biokinool jne.

testi küsimused

1. Kirjeldage spiroheedi morfoloogiat ja värvimismeetodeid.

2. Mis on kõva šanker?

3. Millist materjali uurimiseks võtate süüfilise erinevatel perioodidel?

4. Milline on immuunsus süüfilise vastu?

Mikrobioloogilised uuringud

Uuringu eesmärk: kahvatu treponema avastamine ja serodiagnostika.

Uurimismaterjal

1. Kõva šankri sisu (esmane periood).

2. Roseola, papulide, vesiikulite sisu (sekundaarne periood).

3. Veri (teine, kolmas ja neljas periood).

Põhilised uurimismeetodid

1. Mikroskoopiline.

2. Immunofluorestsentsreaktsioon (RIF).

3. Seroloogiline: 1) Wassermani reaktsioon (RSK);

2) settereaktsioonid.

4. Treponema immobilisatsioonireaktsioon (RIT).

Seroloogiline diagnoos

Wassermani reaktsioon. Reaktsioon seatakse vastavalt komplemendi sidumise reaktsiooni põhimõttele (tabel 52). See erineb selle poolest, et Wassermani reaktsioonis saab kasutada mittespetsiifilist antigeeni. Näiteks veise südame lipoidiekstrakt on kardioantigeen. Selle antigeeniga reageerivate antikehade mittespetsiifilisuse tõttu nimetatakse neid reagiinidena. Reaktsioon mittespetsiifilise antigeeniga on seletatav asjaoluga, et globuliinide sisaldus patsiendi vereseerumis suureneb ja nende dispersiooniaste muutub. Globuliinid, kombineerituna lipiidiekstraktidega, moodustavad kompleksi, mis seob komplementi ja seetõttu hemolüüsi ei toimu (hemolüütilises süsteemis). Hemolüüsi puudumine - positiivne reaktsioon - kinnitab seroloogiliselt süüfilise diagnoosi. Seroloogiliste reaktsioonide seadistamisel on vaja kasutada ka spetsiifilisi koetreponeemide ja kultuuriliste antigeene.

Märge. 1) ++++ hemolüüsi täielik hilinemine; - hemolüüs; 2) mittespetsiifiline antigeen nr 1 (veise südame lipoidfraktsioon); 3) spetsiifilised antigeenid nr 2 ja 3, mis on valmistatud treponema kultuuridest.

Settereaktsioonid. 1. Kahni reaktsioon. Patsiendi seerum inaktiveeritakse 56°C juures 30 minutiks. Reaktsiooni tundlikkuse suurendamiseks lisatakse antigeenile (veise südame lipiidide ekstrakt) 0,6% kolesterooli (tabel 53).

Tulemuse arvestamine: positiivse reaktsioonina märgitakse sademete tekkimist.

2. Sachsi-Vitebsky reaktsioon (tsütokoolne settereaktsioon) on Kahni reaktsiooni modifikatsioon. Autorid kasutasid kontsentreeritumat antigeeni, millele on lisatud kolesterooli, mis aitab kaasa sademe kiiremale tekkele.

Treponemi immobilisatsiooni test (RIT). See on kõige spetsiifilisem reaktsioon süüfilise diagnoosimisel.

Praeguseks on selle reaktsiooni jaoks välja töötatud meetod: T. pallidum'iga nakatunud küüliku purustatud munandist saadakse treponeemide suspensioon ja säilitatakse spetsiaalses söötmes, mis ei inhibeeri treponeemide liikuvust. Katseklaasi lisatakse 1,7 ml koetreponeemide suspensiooni, 0,2 ml uuritavat seerumit, 0,1 ml värsket komplementi.

Kontrollid: 1. katseklaasis lisatakse testitava seerumi asemel terve inimese seerum; 2. - valatakse inaktiveeritud seerum Merisiga. Kõik katseklaasid asetatakse eksikaatorisse või anaerostaati, täidetakse gaasiseguga (1 maht süsinikdioksiidi ja 19 mahuosa lämmastikku) ja asetatakse termostaadi temperatuurile 35 ° C. Seejärel kantakse katsematerjal klaasile ja liikuvus. Treponeemide kohta uuritakse pimedas väljas. Reaktsiooni põhimõte seisneb selles, et süüfilisega patsiendi seerum pärsib komplemendi juuresolekul kahvatu treponema liikumist. Määrake immobiliseeritud treponema protsent.

Tulemus loetakse positiivseks, kui immobiliseeritud treponeemid on üle 50%; nõrgalt positiivne - 30-50%; negatiivne - alla 20%.

testi küsimused

1. Millist materjali kasutatakse süüfilise laboratoorseks diagnoosimiseks haiguse erinevatel perioodidel?

2. Millised on meetodid laboriuuringud süüfilise diagnoosimisel?

3. Milliseid antigeene tuleks Wassermani reaktsioonis kasutada?

4. Milliseid koostisosi on vaja treponeemi immobilisatsioonitesti (RIT) tegemiseks? Mis materjali ainest võetakse, mis selles määratakse?

T. pallidum alamliik pallidum - 6-14x0,2-0,3 mikroni suurune spiraalne bakter; kultuurid võivad olla suured suurused. Spiraali lokid on ühesugused, kuid kõrgusega, neid võib olla kuni 14. Nad on võimelised moodustama L-kuju.

Põhiline kuidas süüfilis levib- ristijaotus. Süüfilise põhjustaja ajal ebastabiilne väliskeskkond ja kuivades sureb, aga külma käes peab kuni 50 päeva. Kuumutamine temperatuuril 40 ° C tund aega viib patogeensete omaduste kadumiseni; 48 °C juures surevad bakterid 10 minuti jooksul.

Süüfilise põhjustaja aniliinvärvidega halvasti määrdunud (sellest ka nimi "kahvatu spiroheet"). süüfilise bakterid redutseerige hõbenitraat metalliliseks hõbedaks, mis annab kangastele musta või tumepruuni värvi.

Kodumaises praktikas on Morozovi järgi hõbetamise meetod laialt levinud. Romanovsky-Giemsa sõnul muutub see roosaks ja mittepatogeenseks treponema- lilla või sinine. Kasutatakse ka Burri negatiivset värvimist.

Süüfilise kultuurilised omadused. Süüfilise tekitaja kultuur

Kahvatu spiroheet nõudlik kasvatustingimuste suhtes, kasvab tehissöötmetel halvasti; meetodid kultuuride stabiilseks tootmiseks ei ole veel kättesaadavad.

Meie riigis kõige rohkem süüfilise tüved tuvastasid Kaasani mikrobioloogid V.M. Aristovski ja P.P. Geltzer.

Need "Kaasan" süüfilise tüved koos Reiteri tüvega kasutatakse neid serodiagnostikaks kasutatava Ag valmistamiseks. Pikaajalise kasvatamisega süüfilise bakterid kohanevad lihtsamate keskkondadega (näiteks Kitta-Tarozzi) ja kaotavad oma patogeensed omadused.

Süüfilise kolooniad väikesed, ilmuvad 3-5. kasvatamise päeval.

Artikli sisu

Kahvatu treponema

Morfoloogia ja füsioloogia

T.pallidum on spiraalse kujuga, protoplastse silindriga, mis on keerdunud 8-12 keeriseks. Raku otstest ulatuvad välja 3 periplasmaatilist flagellat. Kahvatu treponema ei taju aniliinvärve hästi, seetõttu peitsitakse seda Romanovsky-Giemsa värviga. Siiski, kõige rohkem tõhus meetod on selle uurimine pimedas väljas või faasikontrastmikroskoobis. Mikroaerofiil. Ei kasva kunstlikul toitainekeskkonnal. T. pallidum'i kasvatatakse küüliku munandikoes, kus see paljuneb hästi ja säilitab täielikult oma omadused, põhjustades loomal orhiiti. Antigeenid. T. pallidum'i antigeenne struktuur on keeruline. Seda seostatakse välismembraani valkude, lipoproteiinidega. Viimased on inimestele levinud ja suured ristreaktiivsed antigeenid veised. Neid kasutatakse süüfilise serodiagnostika Wassermanni testis antigeenina.

Patogeensus ja patogenees

Treponema pallidumi virulentsustegurid hõlmavad välismembraani valke ja LPS-i, millel on pärast rakust vabanemist oma toksilised omadused. Samal ajal võib treponema võime moodustada jagunemisel eraldi fragmente, mis tungivad sügavale kudedesse, ilmselt tingitud ka virulentsusteguritest. Süüfilise patogeneesis on kolm etappi. Primaarse süüfilise korral täheldatakse esmase fookuse moodustumist - infektsiooni sissepääsu värava kohas kõva šankre, millele järgneb tungimine piirkondlikesse lümfisõlmedesse, kus patogeen paljuneb ja koguneb. Primaarne süüfilis kestab umbes 6 nädalat. Teist etappi iseloomustab infektsiooni üldistamine, millega kaasneb patogeeni tungimine ja vereringe veres, millega kaasnevad nahalööbed. Sekundaarse süüfilise kestus ravimata patsientidel on 1-2 aastat. Kolmandas etapis leitakse nakkuslikud granuloomid (lagunemisele kalduvad igemed), mis paiknevad siseorganites ja kudedes. See periood kestab ravimata patsientidel mitu aastat ja lõpeb kesknärvisüsteemi (progresseeruv halvatus) või seljaaju (tasca dorsalis) kahjustusega.

Immuunsus

Süüfilise korral tekib humoraalne ja rakuline immuunvastus. Saadud antikehadel ei ole kaitsvaid omadusi. Rakuline immuunvastus on seotud patogeeni fikseerimise ja granuloomide moodustumisega. Treponema eemaldamist kehast aga ei toimu. Samal ajal põhjustavad ebasoodsad keskkonnatingimused tsüstide moodustumist treponeemidega, mis paiknevad seinas. veresooned. Arvatakse, et see näitab haiguse üleminekut remissiooni staadiumisse. Koos tsüstidega moodustavad treponeemid L-kujulised. Süüfilisega tekib HAR, mida saab tuvastada nahaallergia testiga tapetud treponema suspensiooniga. Arvatakse, et süüfilise tertsiaarse perioodi ilming on seotud HAR-ga.

Ökoloogia ja epidemioloogia

Süüfilis on tüüpiline antroponootiline infektsioon. Haigestuvad ainult need inimesed, kes on looduses nakkuse reservuaariks. Nakkuse edasikandumine toimub seksuaalselt ja palju harvemini - aluspesu ja muude esemete kaudu. Väliskeskkonnas (õhus) sureb treponema kiiresti.

Süüfilis ja muud treponematoosid

Süüfilis on inimese krooniline nakkuslik suguhaigus, millel on tsükliline progresseeruv kulg, mis mõjutab nahka, limaskesti, siseorganid ja närvisüsteemi. Haiguse tekitajaks on Treponema pallidum Süüfilise kujunemisel on kolm peamist perioodi, mille laboratoorsetel diagnostikameetoditel on oma eripärad. Haiguse varases staadiumis on laboratoorseks diagnoosimiseks materjaliks isoleerimine kõvast šankrist, lümfisõlmede täpist, roseoolist, süüfilisest jms kraapidest. Sekundaarsel ja tertsiaarsel perioodil uuritakse vereseerumit ja tserebrospinaalvedelikku.Kuna tavalistes bakterioloogilistes laborites on treponema puhaskultuuride eraldamine võimatu, on haiguse esmasel perioodil (harvem hiljem) võimalik kasutada bakterioskoopilist diagnostilist meetodit. sooritatud. Alates teisest perioodist kasutatakse peamiselt seroloogilisi meetodeid.

Bakterioskoopilised uuringud

Enne patoloogilise materjali võtmist pühkige süüfilise haavand esmalt vatitikuga, et eemaldada rasvane naast ja saastav mikrofloora. Seejärel ärritatakse skalpelli või metallist spaatliga kõva šankri põhja või pigistatakse kummikinnas sõrmedega haavandit jõuliselt külgedelt, et haavaeritist väljutaks. Väikese koguse selge vedelikuga võib seda lisada tilgale 0,85% naatriumkloriidi lahusele. Kui šankri põhjast pole võimalik materjali võtta (fimoos, haavandiarmistumine jne), torgatakse piirkondlikud lümfisõlmed tume vaateväli (parem!), või faasikontrast- või anoptraalmikroskoopi kasutades Kahvatu treponeem pimedas vaateväljas näeb välja nagu kergelt läikiv õhuke õrn spiraal järskude ühtlaste ümarate esmaste lokkidega. Liigutused on sujuvad, nii et see paindub nurga all. Aga pendlilaadsed võnked, mis on sellele eriti iseloomulikud. Süüfilise tekitajat tuleb eristada Treponema refringensist (mis koloniseerib välissuguelundeid), mis on jämedam, karedam, ebaregulaarsete suurte lokkidega ja aktiivsete heitlike liigutustega, kuid ei paindu. Fuzosp-irochetoossed sümbioostreponeemid eristuvad õhukese mustri, õrnade lokkide ja ebaühtlase liikumise poolest.Suusüüfilise diagnoosimisel tuleks kahvatut treponeemi eristada ka hambatreponeemidest, eriti T. dentiumist ja ka T. buccalisest. Esimest neist on üldiselt raske süüfilisest eristada. Tõsi, see on lühem, 4-8 terava lokiga, pendli liikumine puudub. T. buccalis on paksem, jämedate algsete lokkidega ja ebaühtlase liikumisega.Kahtluse korral tuleb arvestada, et kõik saprofüütsed treponeemid, erinevalt kahvatutest, määrivad hästi aniliinvärvidega. Need ei tungi lümfisõlmedesse, seega on punktsioonide uurimisel suur diagnostiline väärtus. Tüüpiliste treponeemide tuvastamine lümfisõlmede punktis kinnitab vaieldamatult süüfilise diagnoosi. Selle eelised seisnevad selles, et materjal uuritakse kiiresti ja kõige iseloomulikum on treponeemide morfoloogia elusolekus. Burri meetodi järgseid tindimäärdeid enam ei kasutata Kui pimedas vaateväljas ei ole võimalik uuringut läbi viia, võib kasutada erinevaid värvimismeetodeid. Kahvatu treponema ei taju aniliinvärve hästi. Paljudest väljapakutud värvimismeetoditest tipptulemused saadud Romanovkim-Giemsa peitsi kasutades. Tehtud määrded fikseeritakse metüülalkohol või Nikiforovi segus. Selgused tulemused saadakse, kui preparaadile valatakse Romanovsky-Giemsa peits. Selleks asetatakse tikkude killud Petri tassi, neile asetatakse slaidiga alusklaas ja valatakse värvainet, kuni see määrdumist märjaks teeb. Värvimisaeg kahekordistub. Mikroskoopias on kahvatuid treponeeme kahvaturoosa värvusega, muud tüüpi treponeemid muutuvad siniseks või sinakasvioletseks.Võib kasutada ka Morozovi hõbetamismeetodit. Treponeemid säilitavad täielikult oma morfoloogilised tunnused ja näevad mikroskoobi all pruunid või peaaegu mustad. Kuid hõbetatud preparaate ei säilitata pikka aega. Viimasel ajal kasutatakse treponema värvimismeetodeid harva.Kui süüfilist ravitakse keemiaravi ravimitega, on patogeensetes materjalides patogeeni tuvastamine peaaegu võimatu isegi tumeda vaatevälja abil. Negatiivse analüüsi saamisel tuleb seda korrata.

Süüfilise seroloogiline diagnoos

Seroloogiliste reaktsioonide läbiviimisel kasutatakse nüüd järgmisi Ukrainas ühtseid uurimismeetodeid: komplemendi sidumise reaktsioon (RCC), immunofluorestsents (RIF), treponeemi immobilisatsioon (PIT), sademete mikroreaktsioon (MPR) ja ensüümi immuunanalüüs (ELISA). peamine ja levinuim reaktsioon oli komplemendi sidumise reaktsioon ehk Wassermani reaktsioon (РВ, RW). Selle seadistamiseks kasutatakse närvisüsteemi kahjustuse korral süüfilisega patsiendi vereseerumit ja tserebrospinaalvedelikku Wassermani reaktsiooni seadmise meetod ei erine RSC läbiviimise tehnikast. Ainus erinevus on see, et RO puhul ei kasutata mitte ainult spetsiifilist treponemaali, vaid mittespetsiifilist kardiolipiini antigeeni.Kubitaalveenist võetakse tühja kõhuga või mitte varem kui 6 tundi pärast sööki 5-10 ml verd. Ärge võtke verd patsientidelt, kellel on kõrgendatud temperatuur, pärast alkoholi ja rasvase toidu joomist, rasedatel 10 päeva enne sünnitust ja sünnitusel naistel. Verest ekstraheeritud seerumit kuumutatakse temperatuuril 56 °C 30 minutit, et inaktiveerida selle enda komplement. RO on tingimata seatud kahe antigeeniga: spetsiifiline ja mittespetsiifiline Ultraheli spetsiifiline treponemaalne antigeen valmistatakse katseklaasides kasvatatud ja ultraheliga eksponeeritud kahvatu treponema (Reiteri tüvi) kultuuridest. Seda toodetakse külmkuivatatud pulbrina. Mittespetsiifiline kardiolipiini antigeen valmistatakse veise südame lipiidide alkoholiga ekstraheerimisel ja ballastisegudest puhastamisel, pakendatud 2 ml ampullidesse. Antigeeni sisestamiseks RO-sse tiitritakse see vastavalt nendele juhistele. Vahetult enne RV seadistamist viiakse komplemendi ja hemolüütilise seerumi tiitrimine läbi sama skeemi järgi nagu RSK-s. Wassermani reaktsioon on esitatud nii kvalitatiivselt kui ka kvantitatiivselt. Kvalitatiivne reaktsioon viiakse läbi kolmes katseklaasis kahe antigeeniga vastavalt tavapärasele skeemile Reaktsiooni tulemusi hinnatakse 4 pluss süsteemi järgi: positiivne reaktsioon - kui hemolüüs on täielikult või oluliselt hilinenud (4 +, 3). +); nõrgalt positiivne reaktsioon - hemolüüsi osaline viivitus (2 +); kahtlane reaktsioon - hemolüüsi kerge viivitus (1 +). Täieliku hemolüüsi korral loetakse RO negatiivseks.Iga positiivse kvalitatiivse reaktsiooni andnud seerumit tuleb samuti uurida kvantitatiivse meetodiga selle järjestikuse lahjendusega 1:10 kuni 1:640.mis on komplektne (4+) või märk. (3+) hemolüüsi viivitus. RO määramise kvantitatiivne meetod on tähtsust hinnata süüfilise ravi efektiivsust. Reagiini tiitri kiire langus näitab edukat ravi. Kui seerumi tiiter pikka aega ei lange, viitab see kasutatud ravimite ebaefektiivsusele ja vajadusele muuta ravi taktikat.Kui pylori seronegatiivse primaarse süüfilise või latentse, tertsiaarse või kaasasündinud süüfilise korral on soovitatav panna Wassermani reaktsioon külmas sama skeemi järgi. Neurosüüfilise kahtluse korral viiakse RO läbi koos tserebrospinaalvedelik, mis on inaktiveeritud, kuna see ei sisalda oma komplementi. Reaktsioonise viiakse lahjendamata tserebrospinaalvedelik ja lahjendused 1: 2 ja 1: 5. Wassermani reaktsioon muutub positiivseks 2-3 nädalat pärast kõva šankri ilmnemist. Sekundaarse süüfilise korral on see positiivne 100% juhtudest, tertsiaarne - 75%.Lisaks kasutatakse seroloogiliste reaktsioonide kompleksis (CSR) skriiningtestina mikrosadestamise reaktsiooni vereplasma või inaktiveeritud seerumiga.

Sademete mikroreaktsioon

Sademete mikroreaktsioon panna kardiolipiini antigeeniga. Reaktsiooni põhimõte seisneb selles, et kui süüfilisega patsiendi vereplasmale või seerumile lisatakse kardiolipiini antigeeni emulsioon, tekib sade (antigeen-antikeha kompleks), mis sadestub helveste kujul. valge värv. Nad kasutavad seda tehnikat: kolm tilka plasmat (või inaktiveeritud seerumit) pipeteeritakse plaadi süvendisse, seejärel lisatakse üks tilk standardse kardiolipiini antigeeni emulsiooni. Reaktsioonikomponendid segatakse plaati loksutades 5 minutit, seejärel lisatakse kolm tilka 0,9% naatriumkloriidi lahust ja jäetakse veel 5 minutiks toatemperatuurile. Kohustuslik kontroll nõrgalt positiivse vereseerumiga. Tulemusi hinnatakse palja silmaga kunstliku valgusallika kohal. Kui auku ilmuvad suured helbed, loetakse reaktsioon positiivseks (4 +, 3 +), keskmiseks ja väikeseks - nõrgalt positiivseks (2 +, 1 +). Kell negatiivne tulemus sadet ei teki.Sadestumismikroreaktsiooni saab läbi viia ka kvantitatiivsel meetodil, et määrata sadestuvate antikehade tiiter ja hinnata selle alusel ravi efektiivsust. Plasmaga saadakse kõrgemad MRP tiitrid kui seerumiga. Välismaal on MRP analoog patsiendi seerumiga VDRL (Veneral disease research laboratoiy) ja plasmaga - RPR (Rapid plasma reagin).

Immunofluorestsentsreaktsioon (RIF)

Süüfilise seroloogiliseks diagnoosimiseks laialdaselt kasutatavate spetsiifiliste reaktsioonide rühm hõlmab kaudset immunofluorestsentsreaktsiooni. Antigeenina kasutab see 7. päeval pärast nakatumist küüliku munandite parenhüümi Nicholsi tüve patogeense kahvatu treponema suspensiooni. Reaktsioon on tehtud kahes modifikatsioonis: RIF-ABS ja RIF-200. Esimeses variandis kasutatakse antikeha sorbenti (sonicat) - ultraheli treponemaalset antigeeni CSC jaoks. Seda toodab Kaunase ettevõte bakteripreparaatide tootmiseks (Leedu). RIF-200 valikuga lahjendatakse patsiendi seerumit 200 korda, et eemaldada grupi antitreponeemsete antikehade mõju.RIF-ABS paigaldatakse õhukestele, hästi rasvatustatud klaasplaatidele. Klaasilõikuriga klaaside tagaküljele on märgitud 10 ringi läbimõõduga 0,7 cm. Ringi sees kantakse klaasile antigeen - kahvatute treponeemide suspensioon - sellises koguses, et jääks 50- 60 neist vaateväljas. Smearid kuivatatakse õhu käes, fikseeritakse leegi kohal ja 10 minutit atsetoonis. Lisage eraldi katsutisse 0,2 ml sorbenti (sonicate) ja 0,5 ml patsiendi vereseerumit, segage hästi. Segu kantakse määrdumisele (antigeen), et see kataks ühtlaselt, inkubeeriti 30 minutit niiskes kambris temperatuuril 3–7 °C (reaktsiooni II faas). Pärast seda pestakse määrdeainet fosfaatpuhvriga, kuivatatakse ja sellele kantakse 30 minutiks antišobuliini fluorestseeruv seerum, mis asetatakse niiskesse kambrisse temperatuuril 37 ° C (II faas). Ravim pestakse uuesti fosfaatpuhvriga, kuivatatakse ja uuritakse fluorestsentsmikroskoobiga.Positiivse reaktsiooni korral kiirgavad kahvatud treponeemid kuldrohelist valgust, negatiivsega ei helenda.200 korda fosfaatpuhvriga. Immunofluorestsentsreaktsiooni läbiviimisel närvisüsteemi süüfilisega patsiendi tserebrospinaalvedelikuga kasutatakse RIF-c ja RIF-10, s.o. vedelik viiakse reaktsioonisegu inaktiveerimata ja lahjendatakse või lahjendatakse 1:10.

Treponema pallidum immobilisatsiooni test (PIT)

Kahvatute treponeemide (PIT) immobiliseerimise reaktsioon põhineb nende liikuvuse kadumisel patsiendi seerumi ja komplemendi immobiliseerivate treponeemsete antikehade juuresolekul anaerobioosi tingimustes. Reaktsiooni antigeenina kasutatakse Nicholsi laboratoorse tüvega nakatunud küüliku munandikoest kahvatute treponeemide suspensiooni. Suspensioon lahjendatakse steriilse 0,85% naatriumkloriidi lahusega nii, et vaateväljas oleks 10-15 spiroheeti.Reaktsiooni läbiviimiseks lisatakse 0,05 ml patsiendi vereseerumit, 0,35 ml antigeeni ja 0,15 ml komplementi. segatakse steriilses katseklaasis. Kogemusega kaasneb seerumi, antigeeni ja komplemendi kontroll. Torud asetatakse anaerostaati, luuakse anaeroobsed tingimused ja hoitakse termostaadis 18-20 tundi temperatuuril 35 ° C. Seejärel valmistatakse igast torust rõhulangud, loendatakse vähemalt 25 treponeemi ja kui palju neist on liikuvad ja kui paljud on liikumatud. Kahvatute treponeemide spetsiifilise immobilisatsiooni protsent arvutatakse valemiga: x = (A-B) / B * 100, kus X on immobilisatsiooni protsent, A on liikuvate treponeemide arv kontrolltorus, B on liikuvate treponeemide arv. treponeemid katseklaasis. Reaktsiooni peetakse positiivseks, kui immobilisatsiooni protsent on 50 või rohkem, nõrgalt positiivne - 30 kuni 50, kahtlane - 20 kuni 30 ja negatiivne - 0 kuni 20. Ovtšinnikov. Katse anaeroobsed tingimused luuakse reageeriva segu (seerum, antigeen, komplement) asetamisega melanžööridesse, mille mõlemad otsad on suletud kummirõngaga. Melangeriini tehnika võimaldab loobuda keerukatest anaerobioosi tekitamiseks vajalikest seadmetest ja aparaatidest, kuid annab tulemusi, mis klassikalisele mikroaneurostaatilisele tehnikale pole kättesaadavad.Süüfilise seroloogilises diagnoosimises peetakse kõige spetsiifilisemaks treponema immobilisatsiooni ja immunofluorestsentsreaktsioone. Ja siiski, PIT-i, hoolimata selle spetsiifilisusest, ei soovitata seadmise keerukuse tõttu laialdaselt kasutada.

Ensüüm-immunoanalüüs (ELISA)

Ensüümiga seotud immunosorbentanalüüs (ELISA) viiakse läbi nii kadriolipiini antigeeniga (mittespetsiifiline, selektsioonireaktsioon) kui ka treponemaalsega (spetsiifiline reaktsioon), mis kinnitab süüfilise diagnoosi.testseerum. Kui see sisaldab treponema vastaseid antikehi, moodustub antigeen-antikeha kompleks (II faas). Pärast seondumata mittespetsiifiliste antikehade mahapesemist lisatakse süvenditesse ensüümiga konjugeeritud antiglobuliini seerum (enamasti mädarõika peroksüdaasiga). Konjugaat on kindlalt kinnitunud antigeen-antikeha kompleksiga (faas II) Pärast seondumata konjugaadi mahapesemist lisatakse süvenditesse OFD-värvimissubstraat - ortofenüleendiamiin (faas III). Peroksidaasi reaktsioon peatatakse väävelhappe lisamisega. Kontrollimiseks panid nad samad proovid positiivse ja ilmselgelt negatiivse seerumiga.Analüüsi tulemuste arvestus toimub fotomeetri abil, mis määrab optilise tiheduse kahe laine režiimis (492 nm ja 620 nm). Ensüümi antikehareaktsiooni seadistamiseks on vaja lisaks fotomeetrile ühe- ja kaheksakanalilisi polüpropüleenist otsaga automaatseid pipette ning sobivaid diagnostiliste testsüsteemide komplekte ELISA meetodit kasutatakse laialdaselt süüfilise seroloogilises diagnostikas. See on sama tõhus haiguse tuvastamisel inkubatsiooniperiood(1-2 nädalat pärast nakatumist), haiguse ja selle varjatud vormide kliiniliste ilmingutega. Väga sageli kasutatakse ELISA-d elanikkonna sõeluuringutel, eriti vereülekandejaamades.Laboripraktikas kasutatakse mõnikord ka immuunadhesioonireaktsiooni (RIP) ja kaudset hemaglutinatsioonireaktsiooni (RNHA). Esimene neist põhineb asjaolul, et Nicholsi tüve patogeensed munanditreponeemid kleepuvad komplemendi ja inimese erütrotsüütide juuresolekul patsiendi seerumiga segamisel punaste vereliblede pinnale. RNHA-d kasutatakse laialdaselt süüfilise diagnoosimisel selle metoodilise lihtsuse tõttu. See muutub positiivseks juba kolm nädalat pärast nakatumist. Positiivne tulemus reaktsioonid püsivad aastaid pärast taastumist. Selle reaktsiooni analoog välismaal on TRHA (Treponema pallidum haemoaglutination).