Les titulaires du brevet RU 2553224 :

Le groupe des inventions concerne la biotechnologie. Des variantes du milieu nutritif pour l'accumulation sélective d'entérobactéries contiennent de l'hydrolysat pancréatique de farine de poisson, ou de la peptone de viande, ou de l'hydrolysat pancréatique de farine de poisson et de peptone de viande (dans un rapport de 1: 1), de la bile modifiée purifiée (JOM), du chlorure de sodium , glucose, phosphate de potassium monosubstitué et vert brillant dans le rapport indiqué. EFFET : les inventions permettent d'augmenter l'efficacité d'accumulation des entérobactéries, les propriétés sélectives du milieu et de simplifier le procédé d'obtention d'un milieu nutritif. 3 n.p. f-ly, 3 tableaux, 9 pr.

L'invention concerne la microbiologie sanitaire et clinique et peut être utilisée pour l'accumulation sélective d'entérobactéries à partir d'eau, d'aliments, de matériel médical, etc.

Principaux cabinets étrangers : Merck « Microbiologie », 2004-2005 p.202 ; HiMedia (HiMedia Laboratories Pvt. Limited (Inde), 1993, p. 80 ; et GEM LLC "Bacteriological Media". Catalogue 2009-2010, p. 48, produisent un bouillon d'enrichissement Mossel pour entérobactéries à base d'hydrolysat pancréatique de gélatine ou de peptone de viande. la teneur en composants en g/l est présentée dans le tableau 1.

Pour le contrôle bactériologique conformément à la Pharmacopée d'État de la Fédération de Russie, édition XII, qui réglemente la liste des milieux nutritifs pour l'enrichissement sélectif des entérobactéries, le bouillon Mossel (Enterobacteria Enrichment Broth-Mossel) OFS 42-0067-07 est fourni.

L'accumulation sélective de tous les types d'entérobactéries dans le bouillon Mossel est due au fait qu'une concentration élevée de bile de boeuf en combinaison avec du vert brillant inhibe la croissance de la microflore associée et que le glucose favorise la croissance des entérobactéries. Les phosphates de sodium-potassium fournissent une grande capacité tampon dans le milieu, ce qui protège la culture des effets nocifs de l'acide résultant.

Jusqu'à présent, en Russie, en raison de l'absence d'un milieu nutritif sec commercial domestique pour l'enrichissement sélectif des entérobactéries dans la pratique de la microbiologie clinique et sanitaire, le bouillon Mossel préparé en laboratoire est utilisé et pour contrôler la pureté microbiologique des milieux médicinaux, le milieu N°3 (milieu d'enrichissement pour bactéries de la famille des Enterobacteriaceae).

Les inconvénients du bouillon Mossel fabriqué en laboratoire conformément à la recette présentée dans le Fonds mondial, édition XII et le milieu n ° 3 sont:

La complexité de la préparation;

L'utilisation de bile bovine non purifiée comme facteur électif - une substance de composition chimiquement indéterminée, ce qui rend difficile l'obtention de résultats objectifs;

Manque de préparations sèches domestiques - peptone et bile, qui ont un haut degré de transparence dans les solutions;

La nécessité d'une filtration dans le cas de l'utilisation des composants principaux du milieu de production domestique, comme étape supplémentaire dans le processus de préparation ;

Faible capacité inhibitrice contre les microbes gram-positifs associés tout en assurant la croissance des entérobactéries ;

Augmentation du coût du milieu s'il est nécessaire d'utiliser des préparations importées.

Le plus proche du bouillon Mossel proposé est le bouillon Mossel commercial (Merck), qui se compose des composants suivants, g/l :

L'inconvénient de l'environnement commercial (Merck) est :

Efficacité insuffisante dans la croissance et l'accumulation sélective d'un certain nombre d'entérobactéries ;

Propriétés inhibitrices insuffisamment prononcées contre les microbes associés;

Disponibilité limitée.

L'objectif de l'invention est de créer un milieu nutritif sec domestique pour l'accumulation sélective d'entérobactéries, avec une plus grande efficacité, avec des propriétés sélectives plus élevées, offrant une accessibilité et obtenant des résultats objectifs de contrôle bactériologique.

Le problème est résolu par le fait que l'on propose un milieu nutritif pour l'accumulation sélective d'entérobactéries, sec, contenant une base protéique, du glucose, du phosphate de potassium monosubstitué et du vert brillant, et comme base protéique il contient de l'hydrolysat de farine de poisson pancréatique, ou de la viande peptone, ou hydrolysat de farine de poisson pancréatique et peptone de viande (dans un rapport de 1:1), bile modifiée purifiée (JOM) et chlorure de sodium dans le rapport quantitatif suivant des composants, g/l :

Première option :

Deuxième option :

Option trois :

Le résultat technique est obtenu grâce à la préparation préliminaire de la bile brute. A cet effet, la bile native de bovin est bouillie et filtrée à travers un tissu filtrant (ceinture) aux points isoélectriques, à chaque valeur de pH, afin de précipiter les protéines et les peptides de haut poids moléculaire. L'étape finale de la préparation de la bile consiste en l'adsorption des impuretés avec du charbon actif, l'introduction de la quantité calculée de phosphate de sodium disubstitué en termes de teneur en solides, d'ébullition et de filtration. Ceci permet de supprimer l'introduction supplémentaire de phosphate de sodium dans la composition du milieu, apportant un fort pouvoir tampon du milieu fini et sa transparence. L'équilibre de la composition des composants du milieu, notamment l'hydrolysat pancréatique de farine de poisson (PGRM), en tant que base nutritive protéique, assure une bonne croissance et des propriétés sélectives du bouillon Mossel.

La méthode d'obtention du bouillon Mossel consiste à mélanger les composants secs, g/l :

L'hydrolysat pancréatique de farine de poisson ou de peptone de viande répond aux besoins de croissance des micro-organismes pour la nutrition azotée. La préparation préliminaire de la bile bovine permet d'obtenir de la bile sèche modifiée (JOM) purifiée, qui apporte un haut pouvoir tampon et une transparence du milieu nutritif préparé, des propriétés inhibitrices vis-à-vis de la flore bactérienne concomitante indésirable et de l'accumulation sélective d'entérobactéries, ce qui n'est pas inhibée en raison de la formation de déchets acides.

La différence entre l'environnement proposé et le prototype est la possibilité d'utiliser avec de la viande un hydrolysat pancréatique de peptone de farine de poisson comme base protéique. La technologie de préparation de la bile brute à l'aide de phosphate de sodium disubstitué élimine son introduction supplémentaire dans le milieu. Le rapport quantitatif des composants du milieu nutritif, son pH, confère au milieu la préservation de bonnes propriétés de croissance, l'efficacité de l'accumulation d'entérobactéries et l'effet inhibiteur sur la microflore qui l'accompagne. Le milieu préparé reste stérile pendant au moins 10 jours

Pour obtenir un résultat technique au stade de la production de bile modifiée purifiée (SPB), bile après précipitation des protéines aux points isoélectriques, adsorption des impuretés avec du charbon actif avec ajout de phosphate de sodium disubstitué à raison de 12,0 g pour 20,0 g de bile, en matière sèche, séchée sur une unité de séchage dans une couche vibrofluidisée A1-FMU.

Exemple 1. Pour préparer le milieu selon la première option, peser les ingrédients suivants, g/l :

Le milieu proposé, transparent, vert, assure la croissance et l'accumulation des souches test suivantes de la famille des Enterobacteriaceae lorsqu'il est inoculé avec 0,5 ml de suspension microbienne à partir d'une dilution de 10 -7 :

E. coli O55:K59 3912/41

S. flexneri 1a 8516

S.typhimurium 79

K. pneumonie 418

K. pneumonie 3534/51

L'environnement proposé inhibe significativement la croissance des microorganismes gram-positifs, en particulier S. aureus Wood-46, à partir d'une dilution de 10 -1 .

Les souches tests de micro-organismes utilisées pour contrôler le milieu ont été obtenues auprès du service de culture de collection du FBSI SRC PMB.

Une suspension de culture standard de chaque souche testée est préparée, correspondant à 10 unités selon l'échantillon de turbidité standard OSO 42-28-85 P, à l'aide d'une solution stérile de chlorure de sodium à 0,9 %. Les suspensions de cultures obtenues par dilutions au 1/10 (4,5 ml de solution de chlorure de sodium à 0,9% avec 0,5 ml de suspension microbienne) sont ajustées à une dilution de 10 -7 (pour S. aureus Wood-46 - à une dilution de 10 -1) et utilisé pour l'environnement de contrôle.

Pour déterminer les propriétés de croissance, l'ensemencement est réalisé dans 0,5 ml d'une suspension microbienne de chacune des souches testées à partir d'une dilution de 10 -7 dans 5,0 ml de bouillon Mossel, soit 10 mc/ml de milieu. Les inoculations ont été incubées à une température de (37 ± 1) ° C pendant 20 à 24 heures.Les résultats du contrôle biologique des échantillons de laboratoire de bouillon Mossel sur un ensemble de souches de test sont présentés dans le tableau 2.

Exemple 2. L'environnement est préparé conformément à l'exemple 1.

Exemple 3. L'environnement est préparé conformément à l'exemple 1.

Les résultats du contrôle biologique sont présentés dans le tableau 2 et sont similaires aux résultats du test de l'exemple 1.

Exemple 4. Pour la préparation du bouillon Mossel, conformément à la deuxième option, peser les ingrédients suivants, g/l :

Les échantillons sont mélangés dans 1 L d'eau distillée, versés dans des tubes à essai de 5 ml et stérilisés par autoclavage à 121°C pendant 5 minutes.

Exemple 5. L'environnement est préparé conformément à l'exemple 4.

Les résultats de la lutte biologique sont présentés dans le tableau 3 et sont similaires aux résultats des exemples de contrôle 1, 2, 3 selon l'option 1.

Exemple 6. Pour la préparation du bouillon Mossel, conformément à la troisième option, peser les ingrédients suivants, g/l :

Les échantillons sont mélangés dans 1 L d'eau distillée, versés dans des tubes à essai de 5 ml et stérilisés par autoclavage à 121°C pendant 5 minutes.

Les résultats du contrôle biologique du bouillon de Mossel conformément à l'option 3 sont présentés dans le tableau 3 et sont similaires aux résultats des tests des exemples 1, 2, 3.

Exemple 7. L'environnement est préparé conformément à l'exemple 6.

Les résultats du contrôle biologique sont présentés dans le tableau 3 et sont similaires aux résultats des tests dans les exemples 1, 2, 3.

Exemple 8. L'environnement est préparé conformément à l'exemple 1.

Les résultats de la lutte biologique sont présentés dans le tableau 2.

Évaluation de la qualité du milieu proposé pour l'accumulation sélective d'entérobactéries avec une violation du rapport quantitatif des ingrédients :

Exemple 9. L'environnement est préparé conformément à l'exemple 1.

Les résultats du contrôle biologique sont présentés dans le tableau 2. La violation du rapport quantitatif des ingrédients du milieu dans les exemples 8, 9 entraîne une détérioration de la croissance, des propriétés inhibitrices et, par conséquent, une diminution du coefficient d'efficacité de l'accumulation d'entérobactéries.

D'après les tableaux de caractéristiques comparatives de la lutte biologique (tableaux 2, 3) on voit que le milieu nutritif proposé conformément aux exemples 1 à 7 présente de bonnes propriétés de croissance, efficace dans l'accumulation d'entérobactéries et inhibe la croissance de staphylococcus aureus.

La comptabilisation visuelle des résultats de l'accumulation d'entérobactéries à la fin de la période d'incubation des cultures a montré des résultats identiques dans les milieux de test et de contrôle.

Une modification du rapport quantitatif des composants du milieu entraîne une violation des indicateurs biologiques de la qualité du milieu proposé.

Ainsi, dans le cas de la préparation du milieu selon les exemples 8, 9, on constate une diminution de l'efficacité d'accumulation des entérobactéries et de l'effet inhibiteur du milieu vis-à-vis de S. aureus Wood-46.

Des tubes inoculés de chaque souche d'essai contenant environ 10 mc/ml - (inoculation nulle) ont été incubés à (37 ± 1) ° C pendant 3 heures pour obtenir des données sur l'efficacité du bouillon Mossel.Pour déterminer la dose d'inoculation de 0, 1 ml de suspension microbienne de chaque souche testée à partir d'une dilution de 10 -7 a été ensemencé sur boîtes de Pétri avec de la gélose GRM. Après l'incubation des inoculations dans le milieu d'accumulation, le contenu des tubes a été mélangé et un ensemencement similaire a été réalisé sur la gélose GRM.

Après 18-20 heures d'incubation des inoculations sur gélose GRM à une température de (37±1)°C, les colonies formées ont été comptées. L'indicateur d'efficacité a été calculé à partir de l'augmentation du nombre de colonies après incubation de la culture dans le milieu d'enrichissement jusqu'au nombre de colonies à zéro inoculation.

Les caractéristiques comparatives de l'efficacité du bouillon Mossel selon l'option 1 sont présentées dans le tableau 3. Les résultats de l'efficacité de l'accumulation d'entérobactéries du bouillon Mossel préparé conformément aux options 2 sont similaires et comparables aux résultats obtenus lors du test du bouillon Mossel, Option 1.

Ainsi, un milieu nutritif sec compétitif domestique pour l'enrichissement sélectif des entérobactéries a été développé, qui présente un certain nombre d'avantages :

l'efficacité d'accumulation des entérobactéries est 1,5 à 2,0 fois supérieure à celle d'un environnement commercial ;

le coefficient d'inhibition contre le staphylocoque est plus de 100 fois supérieur à celui du bouillon de conservation commercial ;

le milieu nutritif est facile à préparer ;

une technologie a été développée pour la clarification de la bile aux points isoélectriques à l'aide de charbon actif et de phosphate de sodium disubstitué, à l'exclusion de son introduction ultérieure dans le milieu nutritif, garantissant la transparence du produit fini ;

éliminé le besoin d'utiliser du phosphate de sodium anhydre disubstitué dans la fabrication d'une préparation sèche;

la possibilité d'utiliser l'hydrolysat pancréatique de farine de poisson avec de la peptone de viande tout en maintenant la croissance et les propriétés sélectives ;

Tableau 1
Bouillon d'enrichissement de moules pour entérobactéries
Nbre p/p	Nom des composants		Bouillon EO de Mossel Bouillon HER, Mossel HiMedia	Bouillon d'enrichissement entérobactérien selon Mossel GEM LLC	Bouillon de moules pour l'enrichissement des entérobactéries (Enterobacteria Erichment Broth-Mossel OFS 42-0067-07)
1	Hydrolysat pancréatique de gélatine	-	-	10,0	10,0
2	Peptone de viande	10,0	10,0	-	-
3	Glucose monohydraté	5,5	5,0	5,0	5,0
4	Bile de taureau	20,0	20,0	20,0	20,0
5	Phosphate de sodium disubstitué	8,0	6,45	7,0	8,0
6	Phosphate de potassium monosubstitué	2,0	2,0	3,0	2,0
7	vert brillant	0,015	0,0135	0,015	0,015
	Milieu pH prêt	7,2±0,2	7,2±0,2	7,2±0,2	7,2±0,2

Tableau 2
Caractéristiques comparatives du contrôle biologique du bouillon de Mossel à base d'hydrolysat pancréatique de farine de poisson, g/l
Nbre p/p	Nom de la souche d'essai	Reproduction	Option 1	Option 1	Option 1	Option 1	Option 1	Bouillon d'enrichissement de moules (bouillon de moules) Merck
Exemple 1	Exemple 2	Exemple 3	Exemple 8	Exemple 9
1	E. coli 25922	10 -7	+++	+++	+++	++	++	+++
		10 -6	+++	+++	+++	+++	+++	+++
2	E. coli 055:K59	10 -7	+++	+++	+++	++	++	+++ sédiment
	3912/41	10 -6	+++	+++	+++	+++	+++	+++
3	S. flexneri la 8516	10 -7	++	++	++	+	+	++
10 -6	++	++	++	++	+	+++
4	S.typhimurium 79	10 -7	+++	+++	+++	++	++	+++
10 -6	+++	+++	+++	+++	++	+++
5	K. pneumonie	10 -7	+++	+++	+++	++	++	+++
	418	10- 6	+++	+++	+++	+++	++	+++ gaz
6	S. aureus-Bois-46	10 -1		Pas de turbidité diffuse	Pas de turbidité diffuse	+ légère turbidité diffuse du milieu	Pas de turbidité diffuse	Pas de turbidité diffuse

Tableau 3
Caractéristiques comparatives du contrôle biologique du bouillon Mossel à base de peptone de viande et d'un mélange de PGRM avec de la peptone de viande dans un rapport de 1: 1, g/l
Nbre p/p	Nom de la souche d'essai	Reproduction	Option 2	Option 2	Variante 3	Variante 3	Bouillon d'enrichissement de moules (bouillon de moules) Merck
	Exemple 4	Exemple 5	Exemple 6	Exemple 7
1	E. coli 25922	10 -7	+++	+++	+++	++	+++
		10 -6	+++	+++	+++	+++	+++
2	E. coli 055:K59	10 -7	+++	+++	+++	++	+++ sédiment
	3912/41	10 -6	+++	+++	+++	+++	+++
3	S. flexneri la 8516	10 -7	+++	+++	+++	+++	+++
10 -6	+++	+++	+++	+++	+++
4	S.typhimurium 79	10 -7	+++	+++	+++	+++	+++
10 -6	+++	+++	+++	+++	+++
5	K. pneumonie	10 -7	+++	+++	+++	+++	+++
	418	10 -6	+++	+++	+++	+++	+++gaz
6	S. aureus-Bois-46	10 -1	Pas de turbidité diffuse	Pas de turbidité diffuse	Pas de turbidité diffuse	Pas de turbidité diffuse	Pas de turbidité diffuse
*+++ - excellente croissance avec turbidité diffuse du milieu ; ++ - bonne croissance avec turbidité diffuse du milieu ;

1. Milieu nutritif pour l'accumulation sélective d'entérobactéries, sec (Mossel Broth), contenant une base protéique, du glucose, du phosphate de potassium monosubstitué et du vert brillant, caractérisé en ce qu'il contient comme base protéique de l'hydrolysat pancréatique de farine de poisson, contient en outre bile (JOM) et chlorure de sodium dans le rapport quantitatif suivant des composants, g/l :

2. Milieu nutritif pour l'accumulation sélective d'entérobactéries, sec (Mossel Broth), contenant de la peptone de viande, du glucose, du phosphate de potassium monosubstitué et du vert brillant, caractérisé en ce qu'il contient de la bile modifiée purifiée (JOM) et du chlorure de sodium dans le rapport quantitatif suivant de composants, g/l :

3. Milieu nutritif pour l'accumulation sélective d'entérobactéries, sec (Mossel Broth), contenant une base protéique, du glucose, du phosphate de potassium monosubstitué et du vert brillant, caractérisé en ce qu'il contient de l'hydrolysat pancréatique de farine de poisson et de la peptone de viande dans un rapport de 1 : 1 en tant que base protéique, contient en outre de la bile modifiée purifiée (JOM) et du chlorure de sodium dans le rapport quantitatif suivant des composants, g/l :

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Composé**:

** La composition est vérifiée et mise en conformité avec les paramètres nécessaires

Cuisine:

Mélanger 45,6 g de poudre M304 ou 30,6 g de poudre M303 dans 1000 ml d'eau distillée. Porter à ébullition pour dissoudre complètement les particules. Si le milieu doit être utilisé le même jour, l'autoclavage n'est pas nécessaire. Sinon, stériliser à l'autoclave à 0,9 atm (118°C) pendant 15 minutes. NE PAS SURCHAUFFER LE MILIEU.

Avertissement: L'azoture de sodium a tendance à former des composés explosifs avec les métaux, il est donc recommandé d'utiliser beaucoup d'eau pour éliminer les milieux résiduels.

Principe et évaluation du résultat :

Ces milieux sont basés sur la formule de Pike (1) proposée pour l'isolement sélectif des streptocoques à partir de divers matériaux, notamment fortement contaminés par la microflore concomitante (2). D'autres auteurs (3) ont montré la possibilité d'utiliser ces milieux pour l'isolement des streptocoques b-hémolytiques du groupe A.

Le digestat de papaïne à base de farine de soja, l'hydrolysat de caséine, les sels et le glucose fournissent des nutriments essentiels à la croissance des streptocoques. L'azide de sodium et le sulfite de sodium inhibent la croissance des bâtonnets gram-positifs et le cristal violet inhibe la croissance des staphylocoques. En même temps, ces inhibiteurs à ces concentrations n'inhibent pas la croissance des streptocoques, de sorte que les milieux peuvent être utilisés pour l'isolement et la culture des streptocoques dans des études sanitaires, épidémiologiques et cliniques. Sur ce milieu, la croissance des bactéries coliformes, Proteus, Pseudomonas et Bacilli est activement supprimée, mais certains staphylocoques et pneumocoques peuvent s'y développer. Toutes les colonies de streptocoques cultivées sur ce milieu nécessitent une identification plus poussée.

Contrôle de qualité:

Aspect poudre :

Poudre jaune fluide homogène.

Densité moyenne finie :

Un milieu est formé, correspondant en densité à 1,5% de gel d'agar (M304).

Couleur et transparence du support fini :

Le milieu est de couleur ambre clair et est clair ou légèrement opalescent si du gel se forme dans les boîtes ou les tubes de Pétri.

Acidité du milieu :

A 25°C, les solutions aqueuses de M304 (4,56% p/v) ou M303 (3,06% p/v) ont un pH de 7,4 ± 0,2.

Biens culturels :

Caractéristiques de croissance des souches de référence après 18-24 heures à 35-37°C.

Souches de micro-organismes (ATSS)	Croissance

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Brochure SIMAS (SELECTA, ILMVAC) Unités de vide et accessoires pour l'extraction en phase solide. Catalogue TEKNOKROMA. Fournisseur SIMAS Balances et densimètre. Catalogue SELECTA. Fournisseur SIMAS Balances électroniques de laboratoire PGW, balances électroniques d'analyse PW. Brochure SIMAS Viscosimètres rotatifs FUNGILAB. Catalogue SIMAS 2009. Viscosimètres. Coupe Ford. Brochure SIMAS (SELECTA) Bains d'eau, d'huile et de sable. Catalogue SELECTA. Fournisseur SIMAS Prise d'air Pinocchio Super pour air comprimé et gaz. Brochure SIMAS (PBI INTERNATIONAL) SAS Prise d'air ISOLATOR pour le contrôle de la qualité de l'air dans les isolateurs et les salles blanches. Brochure SIMAS (PBI INTERNATIONAL) Mélangeurs en ligne à fort cisaillement. Catalogue SIMAS (SILVERSON) Produits de haute qualité pour laboratoires - Caoutchouc, plastique, silicone Armoires réfrigérées de haute précision Hotcold. Brochure SIMAS (SELECTA) Préparation d'échantillons haute performance pour la chromatographie et la spectrométrie de masse. Brochure SIMAS (WHATMAN) SILVERSON Equipement de Mélange à Haute Efficacité 2009. Mélangeurs de Laboratoire à Haute Efficacité SILVERSON. Catalogue 2009. Hotte de sécurité Safetyhood. Plaquette BIOAIR. Fournisseur de SIMAS HPLC, HRHC, MS. Catalogue SIMAS (KONIK-TECH) Chromatographe en phase gazeuse KONIK GC 4000 B. Catalogue SIMAS (KONIK-TECH) Helios C - Hotte à flux laminaire à flux d'air horizontal. Brochure Angelantoni. Fournisseur SIMAS Catalogue général KARTELL (vaisselle en plastique). Fournisseur SIMAS HOMOGENEIZER PROBLEND Fournitures hospitalières. Catalogue SIMAS (PBI INTERNATIONAL, KARTELL) Diluant gravimétrique PRODYUTE Déodorant pour autoclaves - Capsules ANABAC. Plaquette SIMAS (INTERSCIENCES). Déodorant pour autoclaves ANABAC. Brochure SIMAS (INTERSСIENCE) Chromatographie Liquide. Haut-parleurs et accessoires. Catalogue TEKNOKROMA. Fournisseur SIMAS Chromatographie liquide et gazeuse KONIK K2. Catalogue SIMAS (KONIK-TECH) Chromatographe liquide KONIK LC550 B. Catalogue SIMAS (KONIK-TECH) Armoire de protection pour microbiologie [courriel protégé] Plaquette BIOAIR. Fournisseur SIMAS Armoire microbiologique de protection [courriel protégé] 1.2. Plaquette BIOAIR. Fournisseur SIMAS Armoire microbiologique TopSafe. Plaquette BIOAIR. Fournisseur SIMAS Indicateur et papier test. Catalogue MACHEREY NAGEL. Fournisseur SIMAS Indicateurs de débit, adaptateurs et robinets. Brochure SIMAS (KARTELL) Indicateurs, biologiques et chimiques. Brochure SIMAS (MESA LABS) Instrument automatisé ChromaZone Instruments médicaux. Brochure SIMAS (NUOVA APTACA) Recherche des propriétés anticorrosives des huiles GOST 19199. Brochure SIMAS (SELECTA, WHATMAN) Recherche des produits pétroliers. Brochure SIMAS (KOEHLER INSTRUMENT) Recherche de produits pétroliers. Catalogue SIMAS (KOEHLER) Innovations 2008 Recherche de produits pétroliers. Catalogue SIMAS (KOEHLER, LE TINTOMETRE, SELECTA) Bidons et récipients pour liquides inflammables. Brochure SIMAS (SELECTA) Colonnes capillaires pour chromatographie liquide. Catalogue SIMAS (Teknokroma) Catalogue Orum International Nouvelle génération pour le contrôle microbiologique de l'air Préleveur d'air biologique Catalogue - ALLA FRANCE Catalogue - KARTELL - Accessoires de laboratoire Catalogue - Appareils de laboratoire pour hôpitaux Catalogue Heinz Herenz 2009. Accessoires médicaux et de laboratoire. Catalogue NASCO - Packs Whirl-Pak Le catalogue WHATMAN est un leader dans la technologie de séparation. Fournisseur SIMAS Whatman Catalogue 2009-2010 – Touching Life. Fournisseur SIMAS. Catalogue des milieux de culture LAB M. Fournisseur SIMAS. Whatman Catalog Book #1 - 1000 Lab Trivia Book #1 - Biological Air Samplers Book #10 - Soxhlet Extraction Book #11 - High Efficiency Mixers - Laboratory, Pilot & Industrial Book #12 - Laboratory Glassware Cleaning and Disinfection Book #2 - Innovations for laboratoire de microbiologie Cahier #2 - Pompes et échantillonneurs Cahier #3 - Détermination des points d'éclair et d'auto-inflammation. Livre de la série pétrochimique n° 3 - Livre de laboratoire de chimie moderne n° 4 - Livre de recherche sur le lait et la bière n° 5 - Livre de filtration sous vide et sous pression n° 6 - Recherche sur les propriétés de l'huile de pétrole - Livre de la série pétrochimique n° 6 - Diagnostic microbiologique de l'eau, des boissons et des solutions Livre n° 7 - Etude des propriétés plastiques des lubrifiants. Livre #7 de la série pétrochimique - Livre #8 du laboratoire microbiologique moderne - Étude des propriétés rhéologiques - Livre #8 des analyseurs de texture - Étude des propriétés rhéologiques. analyseurs de textures. Série "Bibliothèque de laboratoire". Livre #9 - Analyse de la texture des produits industriels Livre #11 - Mélangeurs à haute efficacité. Laboratoire, pilote et industriel. Série "Bibliothèque de laboratoire". Livre n° 12 - Lavage et désinfection de la verrerie de laboratoire. Série "Bibliothèque de laboratoire". Livre #2 - Pompes et échantillonneurs. Série "Bibliothèque de laboratoire". Livre numéro 3 - Laboratoire de chimie moderne. Série "Bibliothèque de laboratoire". Livre #4 - L'étude du lait et de la bière. Série "Bibliothèque de laboratoire". Livre #5 - Filtration sous vide et sous pression. Série "Bibliothèque de laboratoire". Livre numéro 6 - L'étude des propriétés des huiles de pétrole. "Bibliothèque de laboratoire. Série pétrochimique." Ouvrage n°6 - Diagnostic microbiologique des eaux, boissons et solutions. Série "Bibliothèque de laboratoire". Collection de buses de filtre. Catalogue WHATMAN (BATMAH). Fournisseur SIMAS Colonnes pour chromatographie en phase gazeuse. Catalogue Teknokroma. Fournisseur SIMAS Colorimètres, photomètres et spectrophotomètres. Catalogue SELECTA. Fournisseur SIMAS Chemo-Bench2 Hotte compacte pour laboratoires de chimie. Brochure SIMAS (PBI INTERNATIONAL) Conductimètre et pH-mètres. Catalogue SELECTA. Fournisseur SIMAS Conteneurs et conteneurs pour la collecte des déchets. Brochure SIMAS (NUOVA APTACA) Cuvettes pour la spectrophotométrie. Catalogue HELLMA 2009. BestCellers. Cuves. Catalogue SIMAS (HELLMA GmbH&Co.KG.) Mobilier et équipement de laboratoire. Fournisseur SIMAS. Produits de laboratoire pour le développement et le contrôle des technologies modernes de haute précision et de la recherche scientifique de WHATMAN. Catalogue SIMAS 2009. Matériel de laboratoire #1. Brochure SIMAS (SELECTA) Matériel de laboratoire #2. Brochure SIMAS (SELECTA) Équipement de laboratoire #3. Brochure SIMAS (SELECTA) Equipement de laboratoire pour l'analyse du lait. Catalogue FUNKE-GERBER. Instruments et accessoires de laboratoire. Catalogue SELECTA. Fournisseur SIMAS Palettes de laboratoire. Brochure SIMAS (BUNSEN) Appareils de laboratoire pour les institutions médicales №1. Brochure SIMAS (SELECTA) Appareils de laboratoire pour établissements médicaux №2. Brochure SIMAS (SELECTA) Mélangeur à pales de laboratoire Bag Mixer 400. Brochure SIMAS (INTERSСIENCE) Purificateur d'eau de laboratoire Micromatic Hotte à flux laminaire II classe de protection SPACE2 ergosafe. Brochure SIMAS (PBI INTERNATIONAL) Hotte à flux laminaire MINIFLO. Brochure SIMAS (PBI INTERNATIONAL) Hotte à flux laminaire II classe de protection SPACE Luce. Brochure SIMAS (PBI INTERNATIONAL) Homogénéisateur à palettes MiniMix 100 CC. Plaquette SIMAS (INTERSCIENCES). Agitateurs magnétiques et bascules. Catalogue SELECTA. Fournisseur SIMAS Huiles lubrifiantes et additifs. Méthode de détermination du degré de pureté GOST 12275. Brochure SIMAS (WHATMAN, SELECTA, ILMVAC) Masse - spectromètre KONIK MS Q12. Catalogue SIMAS (KONIK-TECH) Congélateurs médicaux ultra-basse température. Brochure Angelantoni. Fournisseur SIMAS Filtration membranaire pour les laboratoires de microbiologie de Munktell. Fournisseur SIMAS. Les moniteurs microbiologiques sont des systèmes clés en main pour la préparation d'échantillons liquides. Brochure SIMAS (WHATMAN) Produits microbiologiques PBI. Fournisseur SIMAS Contrôle microbiologique des eaux et des boissons. Catalogue SIMAS (WHATMAN) Microbiologie - 2004 - PBI International Microbiologie. Catalogue Interscience 2011. Prestataire SIMAS Microbiologie. Catalogue Intersciences. Fournisseur SIMAS. Microbiologie. Catalogue WHATMAN Schleicher & Schuell. Fournisseur SIMAS Microbiologie : dilution, homogénéisation, ensemencement en spirale, comptage automatique des colonies, autoclavage. Catalogue SIMAS (INTERSIENCE) Mélangeurs de laboratoire multifonctionnels. Catalogue SILVERSON MACHINES. Fours à moufle. Catalogue SELECTA. Fournisseur SIMAS Plaques chauffantes et réchauffeurs pour ballons à fond rond. Catalogue SELECTA. Fournisseur SIMAS Pompes à vide, péristaltiques, centrifuges. Catalogue SELECTA. Fournisseur SIMAS Pompes, remplisseuses, échantillonneurs. Catalogue Burkle 2010-2011 rus. Benchtop Torque Tester Membranes de nitrocellulose ST Protran pour des tests avancés de protéines. Brochure SIMAS (WHATMAN) Le nouveau catalogue Burkle 2010 en russe. Pompes, échantillonneurs, conteneurs, plastiques de laboratoire, raccords (tubes, raccords, colliers). Supports à base de cellulose pour colonnes chromatographiques et CCM. Brochure SIMAS (WHATMAN) Equipement pour l'analyse du lait. Catalogue FUNKE GERBER. Fournisseur SIMAS Equipements et consommables pour laboratoires PCR et ELISA. Plaquette SIMAS. Dispo-Head stérile jetable pour prises d'air SAS. Brochure SIMAS (PBI INTERNATIONAL) Pipettes sérologiques à usage unique. Catalogue Kartel. Fournisseur SIMAS Incinération - fours à moufle, creusets, pinces. Brochure SIMAS (SELECTA) Détermination de l'eau dans les produits pétroliers GOST 2477. Brochure SIMAS (SELECTA, WHATMAN) Détermination de la viscosité des produits pétroliers. Brochure SIMAS (KOEHLER INSTRUMENT) Détermination de la viscosité. Brochure SIMAS (FUNGILAB, SELECTA) Détermination des savons d'acide naphténique dans les carburants GOST 21103. Brochure SIMAS (WHATMAN, SELECTA, KARTELL) Détermination des sédiments dans le pétrole brut par la méthode de filtration sur membrane ASTM D4807-05. Brochure SIMAS (WHATMAN, SELECTA, ILMVAC) Détermination des impuretés mécaniques dans les produits pétroliers. GOST 10577. Brochure SIMAS (WHATMAN, ILMVAC) Optique : microscopes, réfractomètres, microtome. Catalogue SELECTA. Fournisseur SIMAS Prélèvement : solide, friable, pommade, liquide. Brochure SIMAS (PBI INTERNATIONAL) Évaluation de la force de couple Sacs Torqo-II+ SSB - Système de transport d'échantillons ultra-sûr. Brochure SIMAS (NASCO) Sto-Circul-Bags pour l'homogénéisation. Brochure SIMAS (PBI INTERNATIONAL) Sacs VORTEX - prélèvement, conditionnement, transport, homogénéisation et stockage des échantillons. Catalogue SIMAS (NASCO, INTERSCIENCE, PBI INTERNATIONAL) Packages VORTEX pour les entreprises industrielles. Brochure SIMAS (NASCO) Unité de désinfection portable Formalintec. Brochure SIMAS (PBI INTERNATIONAL) Autoclave automatique portable Auto-Koch. Brochure SIMAS (PBI INTERNATIONAL) Etuves, stérilisateurs, incubateurs et étuves. Catalogue SELECTA. Fournisseur SIMAS Milieux de culture LAB M. Liste complète 2012. Fournisseur SIMAS. Milieux de culture pour la recherche microbiologique en microbiologie clinique et contrôle alimentaire du Lab M. Brochure SIMAS. Verrerie en plastique pour laboratoires. Kartell 2012. Fournisseur de SIMAS. Plaques pour TLC sur une base flexible. Catalogue SIMAS (WHATMAN) Plaques pour la série TLC Diamond. Catalogue SIMAS (WHATMAN) Thermostats à immersion. Catalogue SELECTA. Fournisseur SIMAS Préparation d'échantillons d'eaux souterraines avec Polydisc GW. Brochure SIMAS (WHATMAN) Préparation d'échantillons HPLC - Éléments filtrants à piston Mini-Uni Prep. Brochure SIMAS (WHATMAN) Préparation d'échantillons pour études chromatographiques et spectrométriques. Brochure SIMAS (WHATMAN) Comptage de colonies avec Petri-Light et comptage de colonies. Brochure SIMAS (PBI INTERNATIONAL) Réservoirs en polymère. Catalogue SIMAS (KARTELL) Produits polymères pour laboratoires №1. Brochure SIMAS (KARTELL) Produits polymères pour laboratoires №2. Brochure SIMAS (KARTELL) Produits polymères pour environnements ultra-purs et agressifs de Saint-Gobain. Fournisseur SIMAS. Sacs en polymère pour autoclavage DISPOBAG. Brochure SIMAS (PBI INTERNATIONAL) Gamme complète de produits KONIK-TECH 2007 Catalogue SIMAS. Appareil SMS dans le magazine de l'industrie alimentaire n° 3 2019 Appareil SMS dans le magazine de l'industrie alimentaire n° 4 2019 Appareils auxiliaires pour le test des produits pétroliers Instruments pour l'analyse des produits pétroliers. Catalogue KOECHLER. Fournisseur SIMAS Dispositifs de contrôle et de gestion. Catalogue SELECTA. Fournisseur SIMAS Bouchons. Brochure SIMAS (KARTELL) Préleveur d'air AIRBIO DUO Préleveur d'air SYSTEM KALYTEST Préleveur d'air TRIO.BAS TRIO Préleveur pour l'analyse des aérosols pour Legionella SAS-PCR LEGIONELLA. Brochure SIMAS (PBI INTERNATIONAL) Échantillonneurs alimentaires. Brochure SIMAS (PBI INTERNATIONAL) Programme de vente SIMAS Rondelles. Brochure SIMAS (KARTELL) Comptage simple des colonies et mesure des zones de suppression. Brochure SYNBIOSE. Fournisseur SIMAS. Dilution et homogénéisation d'échantillons pour la recherche microbiologique. Brochure SIMAS (INTERSСIENCE) Tamisage d'échantillons. Filtrer le catalogue. Fournisseur SIMAS Tamisage d'échantillons : instruments et tamis. Brochure SIMAS (FILTRA) Tamisage. Catalogue Filtra 2011. Fournisseur SIMAS. Consommables pour analyses sanguines, équipements auxiliaires de laboratoire. Catalogue SELECTA. Fournisseur SIMAS Consommables pour la microbiologie. Brochure SIMAS (NUOVA APTACA, HEINZ - HERENZ, KARL HECHT) Consommables pour méthodes analytiques optiques. rechercher. Catalogue 2011 Fournisseur SIMAS. Consommables et accessoires. Catalogue HEINZ-HERENZ. Fournisseur SIMAS Consommables, accessoires, équipements pour la microbiologie. Catalogue SIMAS (HEINZ – HERENZ, KARTELL, NASCO, PBI INTERNATIONAL, SELECTA, SAINT-GOBAIN Performance Plasticks) Testeur manuel ST-H0X Pompes rotatives manuelles pour tous liquides. Brochure SIMAS (SELECTA) Famille d'admission d'air. Brochure SIMAS (PBI INTERNATIONAL) SAS Super Réseau de Salles Blanches. Brochure SIMAS (PBI INTERNATIONAL) Système ProtoCOL 2 pour : comptage de colonies, pour mesures de surface. Brochure SYNBIOSE. Fournisseur SIMAS System GAS - TEST Systèmes de purification d'eau Wasserlab Tamis et diffuseurs. Catalogue FILTRA. Fournisseur SIMAS Produits modernes pour les laboratoires, l'industrie et la science. Catalogue SIMAS (BURKLE 2003) Produits modernes pour les laboratoires, l'industrie et la science. Catalogue SIMAS (BURKLE 2007) Verrerie de laboratoire, microscopie, accessoires. Catalogue Assistant-Précision. Produits et accessoires en verre. Catalogue ASSISTANT (KARL HECHT KG). Fournisseur SIMAS Bouchons stériles en cellulose pour la microbiologie. Brochure SIMAS (HEINZ – HERENZ) Thermostats secs. Catalogue SELECTA. Fournisseur SIMAS Compteur de colonies Acolyte. Brochure SYNBIOSE. Fournisseur SIMAS. Compteur de colonies SCAN 100. Brochure SIMAS (INTERSCIENCE). Compteur automatique de colonies PROTOCOLE 3 Tableau de correspondance des colonnes TEKNOKROMA avec les colonnes d'autres fabricants. Fournisseur SIMAS Thermomètres, aréomètres pour tous types d'industries. Catalogue 2011. Fournisseur SIMAS Thermomètres, aréomètres, réfractomètres pour l'industrie agroalimentaire. Catalogue 2008 rus. Fournisseur SIMAS Test de propreté de surface IGIENTEST. Brochure SIMAS. Technologies de filtration et de séparation. Munktell Catalogue 2012. WHATMAN - Filtre GDX Bains de nettoyage à ultrasons. Catalogue SELECTA. Fournisseur SIMAS MBS -I Installation de filtration à membrane sous vide pour l'industrie alimentaire. Brochure SIMAS (WHATMAN) MBS-II Installation de filtration à membrane sous vide pour l'industrie pharmaceutique. Brochure SIMAS (WHATMAN, ILMVAC) Remplisseur automatique de boîtes de Pétri Elios Premium. Brochure SIMAS (PBI INTERNATIONAL) Thermosoudeuse de sachets. Brochure SIMAS (INTERSСIENCE) Papier filtre Munktell & Filtrak. Fournisseur SIMAS. Papier filtre pour analyse quantitative. Brochure de Munktell. Fournisseur SIMAS. Papier filtre pour les laboratoires de chimie dans l'industrie agro-alimentaire et l'agriculture de Munktell. Fournisseur SIMAS. Papier filtre de marque FILTRAK. Brochure de Munktell. Fournisseur SIMAS. Système de filtration MBS I pour le contrôle microbiologique. Brochure SIMAS (WHATMAN) Système de filtration MBS II pour le contrôle microbiologique. Brochure SIMAS (WHATMAN) Filtres seringues GD/X pour liquides visqueux. Brochure SIMAS (WHATMAN) Filtres papier et fibre de verre, manchons d'extraction. Brochures SIMAS (WHATMAN)-(BATMAH) Systèmes de réfrigération et de congélation. Catalogue SELECTA. Fournisseur SIMAS Chromatographie pour l'industrie laitière. Fournisseur SIMAS Chromatographie. Catalogue Teknokroma 2009-2010. Fournisseur SIMAS. Manchons d'extraction en cellulose pour extraction Soxhlet. Brochure de Munktell. Fournisseur SIMAS. Centrifugeuses. Catalogue SELECTA. Fournisseur SIMAS Armoires de sécurité - 1 Armoires de sécurité - 2 Armoires de sécurité - 3 Armoires de sécurité - 4 Tuyaux sans phtalate. Catalogue Saint-Gobain Fournisseur SIMAS. Tuyaux et tubes Tygon. Application. Fournisseur SIMAS. Tuyaux et tubes TYGON. Spécifications techniques. Fournisseur SIMAS. Tuyaux. Brochure SIMAS (KARTELL) Rack pour sacs d'homogénéisation BagRack 400. Brochure SIMAS (INTERSCIENCE)

Le bouillon de sélénite est un milieu d'enrichissement aux propriétés sélectives, conçu pour isoler les bactéries pathogènes du genre Salmonella (lat. Salmonella). Il est très efficace s'il est nécessaire de détecter ce pathogène particulier parmi d'autres représentants de la microflore intestinale. Le milieu est utilisé à la fois pour les diagnostics cliniques et à des fins sanitaires dans les tests alimentaires.

caractéristiques générales

Le bouillon de sélénite est préparé à base d'une poudre, qui est un mélange homogénéisé de divers composants de la composition. La couleur de la matière sèche peut être jaune clair ou crème, selon le type de support. La poudre a des propriétés d'écoulement libre.

Le bouillon de sélénite prêt est un milieu transparent liquide de couleur jaune clair. Cette masse est versée dans des conteneurs où l'ensemencement est effectué pour une incubation ultérieure.

Il existe trois principaux types de bouillon de sélénite :

• l'environnement dans sa forme pure - adapté à l'isolement des salmonelles à partir de matériel clinique et sanitaire ;
• avec l'ajout de mannitol (bouillon à deux composants) - conçu pour fonctionner uniquement avec du matériel clinique;
• milieu cystéine-sélénite - peut être utilisé pour isoler les salmonelles du biomatériel pathologique du patient (fèces, urine, etc.).

Ces types diffèrent légèrement dans la composition des composants et les caractéristiques de l'action.

La tâche principale du bouillon de sélénite est de favoriser l'accumulation de salmonelles en inhibant la croissance de la microflore associée. Cela permet non seulement de détecter l'agent pathogène dans le matériau, mais également de le transférer ultérieurement sur gélose. Le milieu a été développé par Leifler, qui a été le premier à découvrir l'effet sélectif de la sélénite contre Salmonella.

Composé

La composition du bouillon de sélénite comprend:

• hydrolysat de caséine;
• lactose;
• phosphate de sodium;
• hydrosélénite de sodium.

Le milieu sélénite-cystéine, en plus de ces composants, contient de la L-cystéine et de l'hydrogénophosphate de sodium. La composition du bouillon de mannitol diffère en ce qu'au lieu de l'hydrolysat de caséine, il comprend un digestat peptique de tissu animal. Il n'y a pas de lactose dans un tel environnement, mais il y a du mannitol. Ce dernier agit comme un substrat fermentescible et apporte les propriétés tampons du bouillon.

Tous les composants de la poudre, à l'exception de l'hydrosélénite de sodium, sont conditionnellement appelés partie A et la substance sélective est appelée partie B.

Principe de fonctionnement et propriétés de l'environnement

Le bouillon de sélénite fonctionne comme un milieu d'accumulation sélectif. L'effet sélectif est fourni en raison de la toxicité du sélénite, qui inhibe la croissance de la plupart des micro-organismes. Dans le même temps, les bactéries du genre Salmonella sont capables de restaurer ce composé, éliminant ainsi l'effet toxique sur leurs propres cellules. Cependant, à la suite de la réaction, un alcali se forme, ce qui réduit l'effet néfaste de la sélénite sur la croissance de la microflore associée, et il devient donc nécessaire de stabiliser le pH. Cette fonction est remplie par des bactéries qui fermentent le lactose avec formation d'acide. Le tamponnage du milieu est assuré par le phosphate.

Dans un bouillon à deux composants, le pH est stabilisé par le mannitol. Le milieu cystéine améliore l'effet sélectif contre Salmonella. Un tel bouillon est efficace pour contrôler le fond infectieux chez les patients présentant un stade non aigu de la maladie ou les convalescents.

La manifestation des caractéristiques de croissance des souches de référence dans le milieu peut être observée 12 à 24 heures après le début de l'incubation. Dans ce cas, les salmonelles forment des colonies incolores.

Fonctions de cuisson

La préparation du milieu s'effectue en deux étapes. Tout d'abord, une solution est préparée avec un composant sélectif à raison de 4 grammes de sélénite de sodium par litre d'eau distillée. Ajoutez ensuite 19 grammes de la poudre principale (partie A). La solution est soigneusement mélangée et chauffée jusqu'à ce que les particules soient complètement dissoutes, après quoi elle est versée dans des tubes à essai stériles.

Lors de la cuisson, il est important de surveiller le régime de température, car l'environnement est instable à la surchauffe. La stérilisation du bouillon ne peut être effectuée qu'au bain-marie ou à l'aide d'un jet de vapeur. L'autoclavage du milieu est strictement inacceptable.

directions
Ajouter 13,8 g de Bolton Broth à 500 ml d'eau distillée. Stériliser à l'autoclave à 121°C pendant 15 minutes. Refroidir à 50°C. Ajouter aseptiquement 25 ml de Laked Horse Blood SR0048 et 1 flacon de Bolton Broth Selective Supplement SR0183, reconstitué comme indiqué. Bien mélanger et répartir dans des récipients stériles à bouchon vissé.

La description
Le bouillon d'enrichissement sélectif Bolton est destiné au pré-enrichissement de Campylobacter dans les échantillons alimentaires. Campylobacter sont des organismes microaérophiles à Gram négatif en forme de spirale qui peuvent être présents dans le lait cru, l'eau non traitée, les aliments mal manipulés et les viandes, volailles et crustacés insuffisamment cuits. La consommation humaine de ces organismes peut entraîner une gamme de maladies cliniques allant de la colonisation asymptomatique transitoire à la dysenterie sévère. Les symptômes de l'entérite à Campylobacter comprennent la diarrhée, des douleurs à l'estomac, des nausées, de la fièvre, des maux de tête et des douleurs musculaires. Complications de l'infection par Campylobacter jejuni peuvent inclure des appendicectomies inutiles à la suite de douleurs abdominales, d'arthrite réactionnelle ou du syndrome de Guillian-Barré 1 . L'infection à Campylobacter est reconnue comme l'une des causes les plus courantes de gastro-entérite bactérienne chez l'homme, et la dose infectieuse minimale peut être aussi faible que 500 à 800 cellules 1 .
Depuis la prise de conscience du rôle apparent de Campylobacter dans la maladie humaine a été renforcée par Skirrow en 1977 2 , un grand nombre de milieux de culture ont évolué en réponse à la nécessité d'optimiser les performances. Il y a eu une reconnaissance précoce de la nécessité d'une culture d'enrichissement lors de l'examen d'échantillons alimentaires pour surmonter les effets néfastes que les techniques de transformation et de conservation des aliments peuvent avoir sur Campylobacter cellules. L'utilisation de températures d'incubation plus basses dans les premiers stades de l'enrichissement est maintenant largement établie comme une aide à la récupération des cellules 3 . Ce principe a été employé par Bolton dans le développement de son bouillon d'enrichissement 4 .
Campylobacter peut être blessé par les procédures de transformation et de conservation des aliments 3 . Cela les rend sensibles aux agents sélectifs qui sont tolérés par les cellules non endommagées. Les résultats faux négatifs sont évités grâce à l'utilisation d'un milieu de récupération tel que le bouillon d'enrichissement sélectif Bolton qui augmente le nombre de cellules disponibles pour la culture, d'abord en réanimant les organismes blessés, puis en les encourageant à se multiplier.
Le bouillon d'enrichissement sélectif Bolton contient des nutriments pour faciliter la réanimation des cellules lésées de manière sublétale et est formulé pour éviter le besoin d'une atmosphère microaérobie. L'incubation initiale est effectuée à 30-37°C, selon le type d'aliment à examiner. Après le pré-enrichissement, la température d'incubation est portée à 42°C pour augmenter les pressions sélectives sur les organismes concurrents.
L'inclusion de métabisulfite de sodium et de pyruvate de sodium dans le bouillon Bolton éteint les composés toxiques qui peuvent se former dans le milieu de culture. Ces ajouts augmentent également l'aérotolérance de la culture. Les antibiotiques contenus dans Bolton Broth Selective Supplement SR0183 optimisent la sélectivité pour Campylobacter spp. Vancomycine - actif contre les Gram-positifs. La céfopérazone est principalement active contre les Gram-négatifs. Triméthoprime - actif contre une grande variété d'organismes Gram-négatifs et Gram-positifs. Cycloheximide - actif contre les levures.

Technique
Une méthode d'utilisation est la suivante :
Placer 25 g d'échantillon alimentaire dans 225 ml de bouillon d'enrichissement sélectif Bolton (préparé comme décrit ci-dessus) et homogénéiser le mélange à l'aide d'un Stomacher (ou d'un appareil similaire). Le bouillon d'enrichissement sélectif Bolton ne nécessite pas d'incubation dans un environnement microaérobie, mais doit être utilisé dans des récipients à bouchon vissé qui sont remplis jusqu'à 20 mm du haut 4 . Incuber pendant 4 heures à 37°C, suivi d'une nouvelle incubation à 42°C . Le bouillon peut être sous-cultivé après 24 heures et 48 heures sur CCDA modifié (CM0739 + SR0155) ou Preston Agar (CM0689 + SR0117 + SR0048) 4 .
Pour d'autres méthodes, veuillez vous référer à BAM 5 .

Conditions de stockage et durée de conservation
Conserver le milieu déshydraté à 10-30°C et utiliser avant la date de péremption indiquée sur l'étiquette.
Conserver le milieu préparé à 2-8°C pendant 2 semaines maximum.

Apparence
Milieu déshydraté : Poudre fluide de couleur paille.
Milieu préparé : Bouillon : Solution de couleur paille contenant de petites particules noires.

Contrôle de qualité